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Ri-1-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
Ri-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Ri-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2057 |
中文名称 | GFP 标记的 Ri-1 稳转株 |
Lot number | Ri-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10％FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
1. 核心组件解析
Ri-1：
通常指特定的基因或蛋白（需结合具体研究背景），可能是目标基因（如受体、酶、信号分子等），用于研究其功能、表达调控或与其他分子的相互作用。
GFP（绿色荧光蛋白）：
作为报告基因，表达后可发出绿色荧光，便于通过荧光显微镜、流式细胞术等实时追踪细胞内目标基因的定位和表达情况。
优势：操作直观、灵敏度高，适用于动态观察细胞行为（如迁移、分化）或亚细胞结构定位。
Puro（嘌呤霉素）：
作为筛选标记，赋予细胞对嘌呤霉素的抗性。在稳转株构建过程中，未成功整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，从而筛选出稳定表达目标基因的细胞株。
2. 稳转株构建流程
通常包括以下步骤：
载体构建：
将 Ri-1 基因、GFP 基因和 Puro 抗性基因插入到同一质粒载体中，形成重组表达载体。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔等方法将重组载体导入宿主细胞（如 HEK293、HeLa 等）。
抗生素筛选：
用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞即为稳定整合目的基因的单克隆细胞株。
克隆鉴定：
通过荧光检测（GFP 表达）、Western blot（Ri-1 蛋白表达）或测序验证目的基因的稳定表达和遗传稳定性。
3. 应用场景
基因功能研究：
利用 GFP 荧光追踪 Ri-1 蛋白的亚细胞定位、表达水平及动态变化，解析其生物学功能（如信号传导、细胞周期调控等）。
药物筛选与毒性评估：
在抗肿瘤药物研究中，可通过 GFP 标记观察药物对表达 Ri-1 基因的肿瘤细胞的杀伤效果，或利用 Puro 抗性筛选耐药细胞株。
细胞示踪与组织成像：
在活体动物模型中，移植 Ri-1-GFP-Puro 稳转株细胞后，通过荧光成像追踪细胞在体内的迁移、定植及分化（如干细胞研究、肿瘤转移模型）。
蛋白互作研究：
结合免疫共沉淀（Co-IP）或荧光共振能量转移（FRET）技术，分析 Ri-1 蛋白与其他分子的相互作用网络。
4. 优势与注意事项
优势：
稳定遗传：目的基因整合至细胞基因组，可长期传代并保持表达。
双重标记：GFP 便于可视化追踪，Puro 抗性确保细胞株纯度。
多功能性：适用于体外细胞实验和体内动物模型。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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