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C1498-GFP-Puro稳转株
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详细内容
C1498-GFP-Puro稳转株
产品名称 | C1498-GFP 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1199 |
中文名称 | GFP 标记的 C1498 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10 % FBS + 1 % P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

来源:它来源于小鼠急性髓系白血病 C1498 细胞系(ATCC®TIB - 49™)。
构建方式:通过慢病毒载体 LV - EGFP - PGK - Puro(Imanis #LV031)对亲本 C1498 细胞进行转导。该载体中,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的 cDNA 在脾灶形成病毒(SFFV)启动子的控制下进行表达,而嘌呤霉素抗性基因(Puro)则在磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子的控制下表达。经过嘌呤霉素筛选,以及甲基纤维素半固体培养基的进一步筛选,获得了高表达 EGFP 的细胞群体,从而得到 C1498 - GFP - Puro 稳转株。
特点及应用:
荧光标记特性:由于表达 EGFP,该稳转株在荧光显微镜下可发出绿色荧光,便于在体外或体内(如在牺牲动物后进行组织观察)对细胞进行追踪和定位,研究细胞的活动,如细胞的生长、迁移、分化等过程。
药物抗性:细胞具有嘌呤霉素抗性,在含有嘌呤霉素的培养基中能够存活并稳定传代,利用这一特性可以在细胞培养过程中通过添加嘌呤霉素来筛选和维持稳定表达 EGFP 的细胞群体,去除未成功转染或丢失了目的基因的细胞。
肿瘤研究应用:C1498 细胞在植入同基因的 C57BL/6 小鼠后可形成肿瘤,C1498 - GFP - Puro 稳转株保留了这一特性,因此可用于建立肿瘤模型,通过观察绿色荧光来研究肿瘤细胞在小鼠体内的生长、转移和侵袭等过程,为肿瘤生物学研究和抗肿瘤药物研发提供重要的工具。
培养条件:通常使用高糖 DMEM 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)、1µg/ml 嘌呤霉素、1mg/ml G418(如果同时存在 Neo 抗性基因)和 1% 青霉素 / 链霉素。嘌呤霉素和 G418 的添加有助于维持细胞对报告基因的高表达,在细胞传代过程中保持稳定的特性。
注意事项:由于该细胞系中报告基因具有免疫原性,在体内研究时建议使用免疫缺陷小鼠。此外,尽管用于转导的慢病毒载体是自我失活型(SIN),但所有涉及该细胞的操作仍应在生物安全二级(BSL - 2)条件下由经过培训的人员进行,以确保实验安全。在某些满足特定标准的情况下,部分机构可能允许在 BSL - 1 条件下处理这些细胞。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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