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P3X63Ag8-GFP-Puro稳转株
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详细内容
P3X63Ag8-GFP-Puro稳转株
英文名称 | P3X63Ag8-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1185 |
中文名称 | GFP 标记的 P3X63Ag8 稳转株 |
Lot number | P3X63Ag8-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

1. 细胞背景
来源:
P3X63Ag8 是一种小鼠骨髓瘤细胞系,源自 BALB/c 小鼠,常用于构建杂交瘤细胞以生产单克隆抗体。该细胞本身不分泌免疫球蛋白,适合作为融合亲本细胞。
特性:
悬浮生长,增殖能力强,适合大规模培养。
缺乏内源性免疫球蛋白表达,便于外源抗体基因的筛选和表达。
2. 稳转株的构建与标记
GFP 标记:
通过基因工程手段将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入 P3X63Ag8 细胞,使细胞表达 GFP,便于通过荧光显微镜或流式细胞术(FACS)直观观察细胞状态、追踪细胞分布或进行分选。
GFP 的激发波长为 488 nm,发射波长为 509 nm,荧光信号强且稳定,是细胞生物学研究中常用的报告基因。
嘌呤霉素(Puro)抗性筛选:
稳转株同时引入嘌呤霉素抗性基因(PuroR),用于筛选成功整合外源基因的细胞。
在含有嘌呤霉素的培养基中,未成功转染的细胞会被杀死,而稳转株因表达抗性基因可存活并稳定传代。
3. 应用场景
单克隆抗体制备:
作为杂交瘤技术的亲本细胞,与免疫后的 B 淋巴细胞融合,筛选分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。GFP 标记可辅助监测融合效率或细胞状态。
细胞生物学研究:
用于细胞增殖、凋亡、信号通路等机制研究,GFP 可实时追踪细胞动态。
通过荧光共定位实验,研究目标蛋白与细胞结构(如线粒体、细胞膜)的相互作用。
药物筛选与毒性测试:
利用悬浮生长特性,适合高通量药物筛选,嘌呤霉素抗性可确保稳转株在长期实验中的遗传稳定性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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