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C166-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
C166-GFP-Puro稳转株
英文名称 | C166-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1993 |
中文名称 | GFP 标记的 C166 稳转株 |
Lot number | C166-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 内皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
C166-GFP-Puro 稳转株概述
C166 细胞是一种小鼠大脑皮层神经元细胞系，常用于神经生物学、细胞生物学等领域的研究。GFP（绿色荧光蛋白）作为报告基因，便于通过荧光显微镜观察细胞状态或蛋白定位。Puro（嘌呤霉素）是一种抗生素，用于稳转株的筛选和维持，含有 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活。
关键信息解析
1. 稳转株的构建原理
通过基因工程技术将含GFP 基因和Puro 抗性基因的质粒载体转染到 C166 细胞中。
利用嘌呤霉素筛选出成功整合外源基因的细胞克隆，形成稳定表达 GFP 的细胞株（即稳转株）。
2. GFP 的应用价值
可视化追踪：GFP 荧光信号可实时观察细胞形态、增殖、迁移或细胞内蛋白的动态分布（如定位至细胞膜、细胞核等）。
实验兼容性：适用于荧光成像、流式细胞术（FACS）、免疫荧光染色等技术，便于定量分析或细胞分选。
3. Puro 筛选的优势
高效筛选：未成功转染的细胞会被嘌呤霉素杀死，确保稳转株的纯度。
长期维持：在培养过程中持续添加嘌呤霉素，可防止外源基因丢失，保证细胞稳定表达目标蛋白。
主要应用场景
（1）神经生物学研究
观察神经元的生长、分化及突触形成过程（利用 GFP 标记细胞骨架或特定神经蛋白）。
研究神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）中神经元的形态变化或蛋白异常聚集。
（2）药物筛选与毒性评估
通过 GFP 荧光强度变化评估药物对神经元的影响（如细胞活性、凋亡率）。
利用稳转株高通量筛选保护神经元或调节神经信号通路的化合物。
（3）基因功能研究
过表达或敲低特定基因后，结合 GFP 标记分析基因对神经元功能的调控机制（如电生理特性、钙离子信号传导）。
培养与维护要点
培养基：
基础培养基通常为 DMEM/F12 或 Neurobasal 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）、谷氨酰胺及双抗（青霉素 / 链霉素）。
嘌呤霉素浓度：筛选阶段一般为 1-5 µg/mL（需预实验优化），维持阶段可降至 0.5-1 µg/mL。
细胞特性：
C166 细胞为永生化神经元，具有类似原代皮层神经元的形态（如多突起）和部分功能（如表达神经标志物 β- 微管蛋白 III）。
需注意传代次数对细胞状态的影响，避免过度传代导致 GFP 表达减弱或细胞特性改变。
质量控制：
定期通过荧光显微镜检查 GFP 表达率（应＞95%）。
可通过 Western blot 验证 GFP 蛋白的稳定表达，或通过测序确认外源基因整合位点。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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