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MH-S-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
MH-S-GFP-Puro稳转株
英文名称 | MH-S-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1981 |
中文名称 | GFP 标记的 MH-S 稳转株 |
Lot number | MH-S-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 巨噬细胞样 |
生长特性 | 半贴壁半悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | MH-S细胞专用培养基 |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
MH-S-GFP-Puro 稳转株概述
MH-S 细胞是源自小鼠肺泡巨噬细胞的永生化细胞系，常用于免疫炎症、肺部疾病等研究。GFP（绿色荧光蛋白）作为报告基因，可通过荧光显微镜直观观察细胞表达情况，追踪细胞动态。Puro（嘌呤霉素）是一种抗生素，用于稳转株筛选，通过抗性基因（如 Puro 抗性基因）使成功整合目的基因的细胞存活。
构建流程
载体构建
将 GFP 基因与 Puro 抗性基因插入表达载体（如慢病毒或质粒载体），形成MH-S-GFP-Puro 重组载体。
载体需包含启动子（如 CMV）驱动 GFP 和 Puro 抗性基因的转录。
细胞转染 / 感染
通过慢病毒感染（适用于难转染细胞）或脂质体转染将重组载体导入 MH-S 细胞。
慢病毒系统需包装质粒（如 psPAX2、pMD2.G）辅助病毒颗粒生成。
抗性筛选
转染后 48⁻⁷2 小时，加入嘌呤霉素（Puro）进行筛选（通常浓度需预实验优化，如 1-5 µg/mL）。
未成功整合载体的细胞因无 Puro 抗性而死亡，存活细胞形成稳转克隆。
单克隆筛选与鉴定
通过有限稀释法或 ** 流式细胞术（FACS）** 分选单克隆细胞，培养获得纯稳转株。
鉴定方法：
荧光显微镜观察：检测 GFP 表达（激发光 488 nm，发射光 509 nm）。
Western blot：验证 GFP 蛋白水平表达。
基因组 PCR：确认载体 DNA 整合到细胞基因组中。
应用场景
细胞示踪与成像
利用 GFP 荧光标记，在活体或离体实验中追踪 MH-S 细胞的迁移、吞噬功能等（如肺部炎症模型中观察巨噬细胞分布）。
药物筛选与机制研究
通过稳转株构建基因过表达或敲低模型（如共表达 GFP 和目的基因），结合 Puro 筛选，研究基因功能（如炎症相关通路调控）。
共培养与细胞互作研究
与其他细胞（如肺泡上皮细胞）共培养时，通过 GFP 区分 MH-S 细胞，分析细胞间信号传递或免疫反应。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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