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SW480-Puro+ffluc稳转株
价格：￥ 3500
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
SW480-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | SW480-ffluc2-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-H2177 |
中文名称 | ffluc2 标记的 SW480 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）稳转细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：空气，100%；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
一、基础概念
SW480 细胞：
SW480 是一种人结肠癌细胞系，源自一名 55 岁男性患者的结肠腺癌组织，常用于肿瘤生物学、癌症药物筛选等研究。该细胞具有较强的增殖能力和侵袭性，是结直肠癌研究的经典模型之一。
稳转株（稳定转染细胞株）：
通过基因工程技术将外源基因（如荧光蛋白基因、抗性基因等）稳定整合到细胞基因组中，使目的基因能够在细胞中长期稳定表达的细胞群体。稳转株可用于研究基因功能、蛋白表达、细胞信号通路等。
Puro（嘌呤霉素）：
一种抗生素，常用于稳转株筛选。携带 Puro 抗性基因（如 puroR）的细胞在含有 Puro 的培养基中可存活，未成功转染的细胞则被淘汰，从而筛选出稳定表达目的基因的细胞株。
ffluc（萤火虫荧光素酶）：
一种报告基因，其表达的荧光素酶可催化荧光素氧化并产生生物荧光。通过检测荧光强度，可定量分析基因表达水平、细胞增殖、肿瘤生长转移等，广泛应用于活体成像、药物代谢等研究。
二、SW480-Puro+ffluc 稳转株的构建流程
载体构建：
将 ffluc 基因和 puro 抗性基因插入到合适的质粒载体（如慢病毒载体、逆转录病毒载体）中，形成重组质粒。
载体需包含启动子（如 CMV 启动子）以驱动基因表达。
细胞转染：
使用脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒包装）等方法，将重组质粒导入 SW480 细胞。
病毒感染效率较高，适用于难转染的细胞类型。
抗性筛选：
转染后，在培养基中添加 Puro（通常浓度为 1-10 µg/mL，需预实验优化），未成功整合抗性基因的细胞死亡，存活细胞即为初步筛选的稳转株。
筛选过程可持续 1-2 周，直至形成单克隆细胞群。
鉴定与扩增：
荧光检测：通过荧光显微镜或流式细胞术检测 ffluc 表达（需加入荧光素底物）。
Western blot：验证荧光素酶蛋白的表达水平。
单克隆化：通过有限稀释法或单细胞分选获得纯合稳转株，确保基因表达的均一性。
三、应用场景
肿瘤生物学研究：
体内成像：将稳转株接种至裸鼠等动物模型，通过活体荧光成像实时监测肿瘤生长、转移及药物疗效（如肿瘤体积变化、转移灶数目）。
细胞增殖分析：荧光强度与细胞数量呈正相关，可通过酶标仪定量检测细胞活力。
药物筛选与药效评估：
利用 ffluc 的荧光信号强度反映药物对肿瘤细胞的抑制效果，筛选潜在抗癌药物或联合用药方案。
基因功能研究：
结合 RNA 干扰（shRNA）或过表达技术，将 ffluc 与目的基因共表达，通过荧光信号间接监测目的基因的表达变化或细胞响应。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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