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A2780-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
A2780-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | A2780-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2205 |
中文名称 | ffluc 标记的 A2780 稳转株 |
Lot number | A2780-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

A2780 细胞系:A2780 细胞是从未经治疗的患者的卵巢癌肿瘤组织中建立的,细胞形态为上皮细胞样,具有贴壁生长的特性,也可以在摇瓶中以悬浮形式生长,是顺铂耐药细胞系 A2780 cis 和阿霉素耐药细胞系 A2780 ADR 的亲本系。
Puro(嘌呤霉素)的作用:在构建稳转株的过程中,Puro 被用作筛选标记。通常将带有 Puro 抗性基因的载体通过慢病毒转染等方式导入 A2780 细胞。转染后的细胞在含有 Puro 的培养基中培养,只有成功导入并稳定表达 Puro 抗性基因的细胞才能存活,从而筛选出稳定转染的细胞株。
ffluc(萤火虫荧光素酶)的作用:ffluc 基因常被用作报告基因。将 ffluc 基因整合到 A2780 细胞的基因组中,使其稳定表达萤火虫荧光素酶。该酶可以催化荧光素底物发生反应,产生生物荧光。通过检测荧光的强度和分布,能够对细胞的生物学行为、基因表达调控以及药物作用等进行实时、非侵入性的监测和分析。例如,在研究药物对肿瘤细胞的作用机制时,可通过观察 ffluc 荧光变化来了解药物对细胞代谢、增殖等方面的影响。
构建过程:一般先将包含 ffluc 基因和 Puro 抗性基因的慢病毒载体包装好,然后用其感染 A2780 细胞。感染后的细胞经过 Puro 筛选,去除未成功转染的细胞,得到稳定表达 ffluc 的 A2780 细胞株,即 A2780-Puro+ffluc 稳转株。在筛选过程中,需要确定合适的 Puro 筛选浓度,通常通过预实验来确定能在一定时间内杀死未转染细胞的最低 Puro 浓度。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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