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CHO-K1-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
CHO-K1-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | CHO-K1-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-O1113 |
中文名称 | ffluc 标记的 CHO-K1 稳转株 |
Lot number | CHO-K1-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | F-12K + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

CHO - K1 细胞背景:CHO - K1 细胞是中国仓鼠卵巢细胞(CHO 细胞)的一个亚克隆,于 1957 年诞生,是早期 CHO 细胞的亚克隆,属于野生型细胞。它具有贴壁生长的特性,生长需要脯氨酸,常被用于生产蛋白类药物,因为它能进行许多翻译后修饰,可在贴壁和悬浮培养中生长良好,生产率高,适用于大规模培养和 GMP 程序,并且适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件,具有更好的稳定性和安全性。
Puro 的作用:Puro 即嘌呤霉素,是一种抗生素。在细胞培养中,它常被用作筛选标记。当细胞被转染了含有 Puro 抗性基因的载体后,只有成功转染并表达出 Puro 抗性蛋白的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,而未转染或未成功表达抗性基因的细胞则会被嘌呤霉素杀死。因此,“CHO - K1 - Puro” 表示该 CHO - K1 细胞株经过改造,具有对嘌呤霉素的抗性,可通过在培养基中添加嘌呤霉素来筛选和维持稳定转染的细胞群体。
ffluc 的作用:ffluc 通常指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)基因。将 ffluc 基因导入 CHO - K1 细胞后,细胞会表达萤火虫荧光素酶。该酶可以催化荧光素底物发生氧化反应,产生生物荧光。通过检测荧光的强度,可以对细胞的活动、基因表达水平、药物作用效果等进行定量分析。例如,在体内成像研究中,可通过检测 ffluc 产生的荧光来追踪细胞在动物体内的分布、增殖和存活情况,或者研究特定基因在不同条件下的表达变化。
构建过程:一般是先将含有 Puro 抗性基因和 ffluc 基因的表达载体通过转染技术导入 CHO - K1 细胞中,然后利用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定转染了目的基因的细胞株,即 CHO - K1 - Puro + ffluc 稳转株。这个过程可能还涉及到单克隆挑选等步骤,以获得遗传背景均一、稳定表达 ffluc 的细胞克隆。
应用领域:在生物医药研究中,该稳转株可用于多种实验。比如在药物研发中,可用于评估药物对细胞的作用机制、药物代谢和药物毒性等方面的研究;在基因功能研究中,可通过检测 ffluc 的表达来反映特定基因的表达调控情况;还可用于构建动物模型,在活体动物体内进行细胞示踪、肿瘤生长监测等研究。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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