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详细内容
EL4-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | EL4-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1203 |
中文名称 | ffluc 标记的 EL4 稳转株 |
Lot number | EL4-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 0.05mM β-巯基乙醇+ IL2 (1000x) + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景知识:稳转株是指基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。构建稳转株的基本原理是将外源 DNA 克隆到带有某种抗性基因的载体上,重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中,再用载体中所含抗性基因进行筛选。
EL4 细胞系:EL4 细胞是一种小鼠淋巴瘤细胞系,常被用于免疫学、肿瘤学等领域的研究,具有典型的淋巴细胞特性,在体外培养条件下生长良好,可作为构建稳转株的宿主细胞。
“Puro” 的含义:Puro 是嘌呤霉素(Puromycin)的缩写。在稳转株构建中,嘌呤霉素常被用作筛选标记。含有嘌呤霉素抗性基因的载体转染到细胞后,只有成功整合了载体并表达出抗性蛋白的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而实现对阳性细胞的筛选。
“ffluc” 的含义:ffluc 通常指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)基因。将 ffluc 基因导入 EL4 细胞构建成稳转株后,细胞能够稳定表达萤火虫荧光素酶。该酶可以催化荧光素底物发生氧化反应,产生生物荧光,通过检测荧光信号,能够方便地对细胞进行示踪、定量分析以及研究基因表达调控等。例如,在体内成像实验中,可以通过检测荧光信号来观察 EL4 - Puro+ffluc 稳转株在动物模型中的分布、增殖以及与其他组织细胞的相互作用等。
EL4 - Puro+ffluc 稳转株结合了 EL4 细胞的特性以及嘌呤霉素抗性筛选和萤火虫荧光素酶报告基因的优势,可广泛应用于细胞生物学、分子生物学、免疫学等多个领域的研究。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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