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YAC-1-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
YAC-1-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | YAC-1-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1207 |
中文名称 | ffluc 标记的 YAC-1 稳转株 |
Lot number | YAC-1-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10%FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液（VGA-0046-0100） |
存储条件 | 液氮 |
一、基本概念
YAC-1 细胞：是一种源自小鼠的淋巴瘤细胞系，常用于免疫学、肿瘤学等领域的研究，例如细胞毒性 T 细胞（CTL）活性检测等。
稳转株（稳定转染细胞株）：通过基因工程技术将外源基因（如报告基因、抗性基因等）稳定整合到细胞基因组中，使细胞能够长期稳定表达目标基因的细胞群体。
Puro：通常指嘌呤霉素（Puromycin），是一种抗生素，常用于稳转株筛选 —— 携带嘌呤霉素抗性基因（如 Puro 抗性基因）的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰。
ffluc：通常指萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）基因，是一种常用的报告基因，其表达产物可催化荧光素发光，通过检测荧光强度可定量分析基因表达水平、细胞增殖或体内肿瘤生长等情况。
YAC-1-Puro+ffluc 稳转株：即通过基因转染技术，将Puro 抗性基因和ffluc 荧光素酶基因稳定导入 YAC-1 细胞中，经筛选后获得的能够稳定表达这两种基因的细胞株。该细胞株可在嘌呤霉素筛选压力下存活，且能通过荧光素酶检测其存在或功能。
二、构建流程（简要）
载体构建：
构建包含Puro 抗性基因和ffluc 基因的重组质粒载体（如慢病毒载体、质粒载体等），通常需在 ffluc 基因前连接启动子（如 CMV 启动子）以驱动其表达。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）等方法，将重组载体导入 YAC-1 细胞。
筛选与克隆化：
在培养基中添加嘌呤霉素，筛选出成功整合外源基因的细胞（未转染细胞死亡）。
通过有限稀释法或单细胞分选，获得单细胞来源的克隆，确保稳转株的遗传稳定性。
鉴定：
分子水平：通过 PCR 检测外源基因是否整合到细胞基因组中。
功能水平：通过荧光素酶活性检测（如加入荧光素底物后测发光值）验证 ffluc 基因的表达。
三、应用场景
肿瘤免疫研究：
作为靶细胞，用于评估 CTL 或 NK 细胞的杀伤活性（如通过荧光素酶活性变化反映细胞存活情况）。
在体内成瘤实验中，通过活体荧光成像技术（IVIS）追踪肿瘤生长和转移（ffluc 发光可被生物发光成像系统检测）。
基因表达分析：
利用 ffluc 作为报告基因，研究启动子活性、信号通路调控等（如与其他基因共转染，通过荧光强度变化分析相互作用）。
药物筛选：
在含嘌呤霉素的培养基中进行药物处理实验，确保细胞为稳定转染的阳性克隆，通过荧光素酶信号监测药物对细胞增殖或凋亡的影响。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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