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LLC-ffluc2-BSD单克隆细胞株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
LLC-ffluc2-BSD单克隆细胞株
产品名称 | LLC-ffluc2-BSD 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-M1209 |
中文名称 | ffluc2 标记的 LLC 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆细胞株； （5）单克隆细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
名称含义
“LLC” 通常指的是小鼠 Lewis 肺癌细胞（Lewis Lung Carcinoma cells），是该细胞株的基础细胞来源。
“ffluc2” 可能代表的是一种荧光素酶基因，如萤火虫荧光素酶基因（Firefly Luciferase Gene）的特定变体或修饰形式，常用于细胞成像和追踪等实验，可通过表达荧光素酶使细胞在特定条件下发出荧光，便于观察和分析细胞的行为、分布等。
“BSD” 一般指杀稻瘟菌素（Blasticidin S）抗性基因，用于在细胞培养过程中进行筛选，只有成功转入含有 BSD 抗性基因载体的细胞才能在含有杀稻瘟菌素的培养基中存活和生长。
构建方法
载体构建：将包含 ffluc2 基因和 BSD 抗性基因的外源载体通过基因工程技术构建出来，通常会使用特定的质粒或病毒载体，如慢病毒载体等，使 ffluc2 基因和 BSD 基因能够在载体中稳定存在并可在转入细胞后进行表达。
细胞转染：采用合适的转染方法，如脂质体转染法、电穿孔法等，将构建好的外源载体导入 LLC 细胞中，使细胞摄取外源基因。
筛选与克隆化：将转染后的细胞置于含有杀稻瘟菌素的培养基中进行筛选，只有成功转入并表达 BSD 抗性基因的细胞才能存活。然后通过有限稀释法或单细胞分选技术等，将存活的细胞进行单细胞分离和培养，获得单个细胞的克隆，即单克隆细胞株，这些单克隆细胞株中就可能包含稳定表达 ffluc2 基因的 LLC-ffluc2-BSD 单克隆细胞株。
应用领域
肿瘤学研究：由于其来源于小鼠 Lewis 肺癌细胞，可用于肺癌相关的基础研究，如肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等机制的探讨。通过观察 ffluc2 基因表达产生的荧光信号，可实时追踪肿瘤细胞在体内外的生长、迁移和扩散情况，为肿瘤治疗药物的研发和疗效评估提供重要的实验依据。
药物筛选：利用该细胞株可以建立细胞水平的药物筛选模型，将不同的药物作用于 LLC-ffluc2-BSD 单克隆细胞株，通过检测细胞的活力、荧光强度变化等指标，评估药物对肿瘤细胞的抑制效果，筛选出具有潜在抗肿瘤活性的药物化合物或生物制剂。
活体成像研究：ffluc2 基因表达的荧光素酶能够在活体动物体内产生荧光信号，将 LLC-ffluc2-BSD 单克隆细胞株接种到小鼠等动物模型中，借助活体成像设备可以直观地观察肿瘤细胞在动物体内的生长动态、肿瘤微环境的变化以及药物在体内的分布和作用过程等，为肿瘤的体内研究提供了有力的工具。
培养与保存
培养条件：一般使用适合 LLC 细胞生长的培养基，如 DMEM 培养基等，并添加一定比例的胎牛血清，以提供细胞生长所需的营养物质和生长因子。同时，要在培养基中添加适量的杀稻瘟菌素，以维持对 BSD 抗性细胞的筛选压力，确保细胞株中 ffluc2 基因和 BSD 基因的稳定表达。培养环境通常为 37℃、5% CO2 的恒温培养箱，保持适宜的温度和气体环境，促进细胞的生长和增殖。
细胞保存：为了长期保存 LLC-ffluc2-BSD 单克隆细胞株，通常采用冷冻保存的方法。将细胞用冻存液（如含有 10% DMSO 的培养基）悬浮后，置于冻存管中，按照一定的降温程序缓慢降温至 - 80℃或更低温度，然后转移至液氮中长期保存。在需要使用细胞时，可将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃水浴中解冻，复苏后的细胞经过培养和鉴定合格后即可继续使用。
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