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LLC-GFP-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
LLC-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | LLC-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1211 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 LLC 稳转株 |
Lot number | LLC-24D1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 半贴壁半悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、核心组成与功能
1. 基础细胞株（LLC）
来源：LLC 一般指小鼠 Lewis 肺癌细胞（Lewis Lung Carcinoma Cells），是研究肺癌转移、肿瘤微环境等的常用模型。
特性：具有强侵袭性和转移性，适合构建小鼠肿瘤模型（如皮下瘤、原位瘤、转移瘤）。
2. 标记基因与筛选元件
GFP（绿色荧光蛋白）
功能：作为可视化标记，用于荧光显微镜下观察细胞形态、定位及迁移，或通过流式细胞术（FACS）分选阳性细胞。
应用场景：追踪细胞在体外培养或体内（如小鼠组织）中的分布。
ffluc（萤火虫荧光素酶）
功能：酶类报告基因，需配合底物（荧光素）使用，通过生物发光成像（BLI）检测细胞活性或肿瘤生长。
优势：可定量分析细胞数量（信号强度与细胞数目正相关），适用于活体动物实时监测（如肿瘤转移、治疗效果评估）。
Puro（嘌呤霉素抗性基因）
功能：筛选稳转株的工具基因。细胞转染后，含 Puro 的培养基可杀死未成功整合目的基因的细胞，仅保留稳定表达 GFP 和 ffluc 的细胞克隆。
二、主要应用场景
1. 肿瘤学研究
活体成像：通过 ffluc 的生物发光信号，监测小鼠体内肿瘤生长、转移灶形成及药物治疗效果（如化疗、靶向治疗）。
细胞示踪：GFP 标记肿瘤细胞，观察其在血管内的黏附、外渗及向远端器官（如肺、肝）的迁移过程。
2. 药物开发与药效评估
构建荷瘤小鼠模型，利用 ffluc 定量分析不同药物对肿瘤体积的抑制作用，或通过 GFP 观察肿瘤微环境中免疫细胞与癌细胞的相互作用。
3. 细胞生物学基础研究
研究细胞增殖、凋亡、信号通路（如将 GFP 与特定蛋白融合，观察其亚细胞定位变化）。
三、稳转株构建流程（简要）
载体构建
设计含 GFP-ffluc 融合基因 和 Puro 抗性基因 的表达载体（如慢病毒载体、质粒载体），确保 GFP 和 ffluc 独立表达或共表达。
细胞转染
将载体导入 LLC 细胞（常用慢病毒感染，因效率高且适合难转染细胞）。
筛选与克隆化
用嘌呤霉素培养基筛选存活细胞（约 2-3 周），剔除未整合载体的细胞。
通过有限稀释法或流式分选获得单克隆细胞株，确保 GFP 和 ffluc 稳定表达。
鉴定与验证
荧光检测：显微镜观察 GFP 阳性率（应接近 100%）。
ffluc 活性检测：加入荧光素后，通过酶标仪或活体成像系统检测发光强度。
功能验证：如检测细胞增殖能力、体内成瘤性是否受标记基因影响。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：LLC-GFP-Puro+ffluc稳转株,ffluc,和,GFP,双标的,LLC,稳转株,LLC-GFP-Puro+ffluc,polyclonal,stable,cell,line
