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Hepa 1-6-GFP-Puro单克隆株
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详细内容
Hepa 1-6-GFP-Puro单克隆株
产品名称 | Hepa 1-6-GFP-Puro 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-M1220 |
中文名称 | GFP 标记的 Hepa 1-6 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆细胞株; (5)单克隆细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
XY-M1220
核心特性
1. GFP 标记的作用
可视化追踪:GFP 作为报告基因,可通过荧光显微镜直接观察细胞形态、分布及动态变化(如迁移、分化),适用于活体成像或细胞示踪实验。
基因表达验证:GFP 常与目标基因共表达,用于验证载体转染效率或蛋白定位(如亚细胞结构中的分布)。
2. Puro 抗性筛选的优势
单克隆筛选:嘌呤霉素(Puro)是一种氨基糖苷类抗生素,可抑制原核和真核细胞的蛋白质合成。通过在培养基中添加 Puro,可有效筛选出稳定整合了含 Puro 抗性基因载体的细胞克隆,确保单克隆株的纯度。
稳定株构建:适用于长期研究(如慢性毒性实验),避免因质粒瞬时转染导致的表达不稳定问题。
3. 细胞来源与培养特性
来源:小鼠肝细胞癌(C57BL/6J 背景)。
形态:贴壁生长,典型上皮样细胞形态。
培养条件:
培养基:常用 DMEM(高糖)+10% 胎牛血清(FBS)+1% 双抗(青霉素 / 链霉素)。
培养环境:37℃、5% CO₂,湿度 95% 以上。
传代比例:1:3~1:5,避免过度汇合导致细胞老化。
应用场景
1. 毒理学研究
评估药物、化学物质对肝细胞的毒性作用(如凋亡、氧化应激),GFP 可辅助观察细胞形态变化,Puro 用于筛选稳定表达毒性相关基因的细胞株。
2. 代谢通路研究
分析肝脏代谢酶(如 CYP450)的表达调控,或脂质、糖代谢相关基因的功能,通过单克隆株排除异质性干扰。
3. 基因编辑与功能验证
结合 CRISPR-Cas9 等工具进行基因敲除或过表达,利用 Puro 筛选稳定克隆,GFP 标记可快速鉴定阳性细胞。
4. 体内成像研究
移植至免疫缺陷小鼠体内,通过活体荧光成像追踪肿瘤生长或肝损伤修复过程。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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