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Hepa 1-6-BSD+ffluc稳转株
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详细内容
Hepa 1-6-BSD+ffluc稳转株
产品名称 | Hepa 1-6-BSD+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-M1222 |
中文名称 | ffluc 标记的 Hepa 1-6 稳转株 |
Lot number | Hepa 1-6-24D4P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

基因特征:该细胞株稳定携带萤火虫荧光素酶基因(ffluc)及杀稻瘟菌素 - s 脱氨酶基因(BSD)。其中,ffluc 基因可编码萤火虫荧光素酶,在有相应底物存在时能发出生物荧光,便于通过活体生物发光成像技术对细胞进行示踪和检测;BSD 基因则使细胞具有对杀稻瘟菌素的抗性,可用于在细胞培养过程中进行抗性筛选,以获得稳定表达 ffluc 基因的细胞。
构建方法:通常采用逆转录病毒将 ffluc 基因和 BSD 基因导入小鼠肝肿瘤细胞 Hepa 1 - 6 中。首先将 ffluc 基因克隆至特定质粒,如 pseb - flag 质粒,获得携带 ffluc 基因的 pseb - fluc 质粒,再将 pseb - fluc 与 pampho 质粒共转染 293 细胞,从而获得逆转录病毒。然后用该逆转录病毒感染 Hepa 1 - 6 细胞,经稻瘟菌素抗性加压筛选,获得抗稻瘟菌素的细胞,这些细胞即为稳定表达 ffluc 基因的 Hepa 1 - 6 - BSD + ffluc 细胞株。
生物学特性:具有与亲代 Hepa 1 - 6 细胞类似的形态及增殖、迁移、侵袭的生物学特性。在细胞增殖方面,其增殖能力不低于亲代细胞;并且在转代至 10 代以上时,ffluc 基因表达水平下降低于 5%,说明该细胞株在传代过程中能较为稳定地表达 ffluc 基因。
应用领域:主要用于建立肝癌动物模型,通过将细胞株植入小鼠体内,利用活体生物发光成像技术动态检测细胞在体内的生物发光信号,可实际反映肝癌细胞的存活、增殖和转移情况,为研究肝癌的发生、发展机制以及药物研发等提供了重要的工具。例如,在抗肿瘤药物研发中,可以将 Hepa 1 - 6 - BSD + ffluc 稳转株接种到动物体内建立肿瘤模型,然后给予不同的药物进行治疗,通过观察生物发光信号的变化来评估药物对肿瘤生长的抑制效果。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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