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Hepa 1-6-BSD+ffluc单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
Hepa 1-6-BSD+ffluc单克隆株
英文名称 | Hepa 1-6-BSD+ffluc monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1223 |
中文名称 | ffluc 标记的 Hepa 1-6 单克隆株 |
Lot number | Hepa 1-6-24D4S |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆株； （5）单克隆株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
基本概念
来源：Hepa 1-6 细胞株是源自 C57/L 小鼠的肝癌细胞株，而 Hepa 1-6-BSD+ffluc 单克隆株是在 Hepa 1-6 细胞株的基础上，通过基因工程技术构建而成的稳定表达杀稻瘟菌素 - S 脱氨酶基因（BSD）及萤火虫荧光素酶基因（ffluc）的单克隆细胞株。
特点：该单克隆株既保留了 Hepa 1-6 细胞的基本生物学特性，如增殖、迁移、侵袭等能力，又因 BSD 基因的表达获得了对杀稻瘟菌素的抗性，同时能在 ffluc 基因的作用下表达萤火虫荧光素酶，可通过生物发光成像技术进行体内外的示踪和监测。
构建方法
逆转录病毒构建：将 ffluc 基因克隆至 pseb-flag 质粒，获得携带 ffluc 基因的 pseb-fluc 质粒，再将 pseb-fluc 与 pampho 质粒共转染 293 细胞，从而获得逆转录病毒。
细胞感染与筛选：利用上述构建好的逆转录病毒感染 Hepa 1-6 细胞，然后在含有杀稻瘟菌素的培养基中进行加压筛选，只有成功导入 BSD 基因并稳定表达的细胞才能存活，这些细胞即为 Hepa 1-6-BSD+ffluc 单克隆株的候选细胞。
鉴定与验证：对筛选得到的细胞进行多方面的鉴定，包括检测 ffluc 基因的表达情况，观察细胞的形态、增殖、克隆形成、迁移、侵袭等生物学特性是否与亲代 Hepa 1-6 细胞相似，以及通过活体生物发光成像技术验证细胞在体内外的发光情况等。
应用领域
肿瘤生物学研究：可用于研究肝癌细胞的增殖、存活、迁移、侵袭以及肿瘤血管生成等生物学过程。例如，通过将该单克隆株接种到动物体内，利用生物发光成像技术实时观察肿瘤的生长和转移情况，深入了解肝癌的发病机制和进展规律。
药物研发与筛选：作为药物筛选的模型，用于评估各种抗癌药物的疗效和作用机制。可以在体外将药物作用于 Hepa 1-6-BSD+ffluc 细胞，观察细胞的生长抑制、凋亡等情况，也可以在体内建立肿瘤模型，给予药物治疗后，通过生物发光成像监测肿瘤对药物的反应，为抗癌药物的研发提供重要的实验依据。
基因治疗研究：可作为基因治疗的靶细胞，研究基因治疗载体在肝癌细胞中的转染效率、基因表达调控以及治疗效果等。例如，将携带治疗性基因的载体导入 Hepa 1-6-BSD+ffluc 单克隆株中，观察其对细胞生长和肿瘤形成的影响，为肝癌的基因治疗提供实验基础。
6 篇资料
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