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4T1-RFP-Puro+ffluc单克隆株
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详细内容
4T1-RFP-Puro+ffluc单克隆株
产品名称 | 4T1-ffluc1-RFP-Puro 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-M1226 |
中文名称 | ffluc1 和 RFP 双标的 4T1 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆细胞株; (5)单克隆细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

来源:基于 4T1 细胞系构建。4T1 细胞是从 410.4 瘤株中未经诱变筛得的 6 - 硫鸟嘌呤抗性细胞株,当注射到 BALB/c 小鼠中时,能自发产生高转移肿瘤,可转移到肺、肝、淋巴结和大脑等部位,常被用作人 IV 期乳腺癌的动物模型。
构建方式:通过慢病毒载体转导技术,将包含红色荧光蛋白(RFP)基因和嘌呤霉素抗性基因(Puro)的表达载体,以及编码萤火虫荧光素酶(ffluc)的基因导入 4T1 细胞中。经过嘌呤霉素筛选,获得稳定表达 RFP 和 ffluc 的细胞株。再通过有限稀释法或软琼脂克隆形成实验等方法进行单克隆化,得到 4T1 - RFP - Puro + ffluc 单克隆株。
应用:
肿瘤研究:可在体外进行细胞增殖、侵袭、迁移等实验,研究肿瘤细胞的生物学特性。利用其在小鼠体内形成肿瘤的能力,通过 RFP 和 ffluc 的标记,在活体动物中直观地观察肿瘤的生长、转移以及对治疗的反应,为肿瘤发生、发展机制的研究和抗癌药物的研发提供重要的模型。
药物研发:用于筛选具有抗肿瘤活性的化合物或生物制剂,评估药物对肿瘤细胞的抑制作用和体内药效,为药物研发提供重要的实验依据。
成像研究:RFP 和 ffluc 的表达使得该细胞株在荧光成像和生物发光成像方面具有重要应用价值。可用于研究肿瘤细胞在体内的分布、定位以及与周围组织的相互作用。
培养条件:一般使用 RPMI - 1640 培养基,添加 10% 的胎牛血清(FBS)、1% 的双抗(青霉素 / 链霉素),以及适量的嘌呤霉素(通常为 2µg/ml)来维持细胞对 RFP 和 ffluc 的稳定表达。培养环境为 37℃、5% CO2 的细胞培养箱。
注意事项:由于该细胞株表达的报告基因可能具有免疫原性,在进行体内实验时,建议使用免疫缺陷小鼠。同时,在操作过程中,需遵循生物安全二级(BSL - 2)实验室的规范和要求,由经过培训的专业人员进行操作。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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