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4T1-GFP-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
4T1-GFP-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | 4T1-ffluc2-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1227 |
中文名称 | ffluc2 和 GFP 双标的 4T1 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）稳转细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
4T1-GFP-Puro+ffluc 稳转株概述
4T1 细胞是源自小鼠乳腺癌的细胞系，具有高度侵袭性和转移性，常用于肿瘤生物学、转移机制及抗肿瘤药物研发等研究。
稳转株是指通过基因工程手段，将外源基因稳定整合到细胞基因组中，并能在传代过程中稳定表达的细胞株。
关键标签与特性
GFP（绿色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，便于通过荧光显微镜或流式细胞术等实时观察细胞形态、定位及存活状态，追踪细胞在体内外的分布（如肿瘤转移研究）。
应用场景：细胞示踪、细胞分选（FACS）、共定位分析等。
Puro（嘌呤霉素抗性基因）
功能：作为筛选标记，用于稳转株构建过程中通过嘌呤霉素药物筛选，淘汰未成功整合外源基因的细胞，保留稳定表达目的基因的细胞株。
ffluc（萤火虫荧光素酶）
功能：作为生物发光报告基因，需配合荧光素底物（如 D - 荧光素），通过活体成像系统检测细胞在动物体内的增殖、转移或药物响应，具有高灵敏度和定量特性。
应用场景：体内肿瘤成像、药效评估、转移灶监测等。
构建流程与技术要点
载体构建
将 GFP、Puro 抗性基因和 ffluc 基因克隆至同一质粒载体（如慢病毒载体），确保各基因独立表达（通常使用不同启动子驱动）。
细胞转染 / 感染
采用慢病毒感染法（适用于难转染细胞）或脂质体转染法，将载体导入 4T1 细胞。
药物筛选
加入嘌呤霉素进行筛选，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞形成稳转克隆。
单克隆筛选与鉴定
通过有限稀释法或流式细胞术分选单克隆细胞，利用荧光显微镜、Western blot 或活体成像验证 GFP 和 ffluc 的表达水平及稳定性。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：4T1-GFP-Puro+ffluc稳转株,ffluc2,和,GFP,双标的,4T1,稳转细胞株,,4T1,稳转细胞株
