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HT-29-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
HT-29-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HT-29-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2236 |
中文名称 | ffluc 标记的 HT-29 稳转株 |
Lot number | HT-29-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
细胞来源：HT-29 细胞是 1964 年由 J・Fogh 用移植培养方法和含 15% FBS 的 F12 培养液从原发性肿瘤分离得到的，来自一位 44 岁白人女性的结直肠腺癌。该细胞在裸鼠和类固醇处理的地鼠中均可致瘤，能合成 IgA、CEA、蛋白绑定 TGF-β 的分泌成分和粘液素等。
构建原理：通过将携带目的基因（如 ffluc，即萤火虫荧光素酶基因）以及嘌呤霉素抗性基因（Puro）的外源 DNA 克隆到载体上，再利用慢病毒等转染方式将重组载体导入 HT-29 细胞，使其整合到细胞染色体中。之后用嘌呤霉素进行筛选，获得能够稳定表达 ffluc 且对嘌呤霉素具有抗性的 HT-29 细胞，即 HT-29-Puro+ffluc 稳转株。
特点与应用：
稳定表达：可在细胞分裂过程中稳定传递目的基因，持续表达萤火虫荧光素酶，便于长期进行相关实验研究，避免了瞬时转染表达时间短、表达量不稳定的问题。
可进行荧光素酶活性检测：萤火虫荧光素酶在有底物存在时可发出荧光，因此该稳转株可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，通过检测荧光强度来反映荧光素酶的活性，进而研究相关基因的表达调控等。
适用于活体动物成像实验：将该稳转株接种到动物体内后，可利用活体动物成像技术，通过检测荧光信号来观察细胞在动物体内的生长、转移和分布等情况，为肿瘤生物学、药物研发等研究提供重要的实验模型。
培养条件：一般使用 90% McCoy's 5A 培养基 + 10% FBS+PS（青霉素 - 链霉素）进行培养，传代比例为 1:2 至 1:3，每周传代 3 次，培养环境为气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃。在培养过程中，若担心抗性随着传代时间降低，可定期用 0.5ug/ml 浓度的嘌呤霉素维持筛选压力。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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