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RAW264.7-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:17
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详细内容
RAW264.7-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | RAW264.7-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1238 |
中文名称 | ffluc 标记的 RAW264.7 稳转株 |
Lot number | RAW264.7-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 不规则圆形细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
关键元素解析
Puro（嘌呤霉素）
是一种抗生素，常用于筛选成功转染外源基因的细胞。含有 Puro 抗性基因的细胞株（如通过质粒载体导入），可在含有 Puro 的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰。
作用：确保稳转株中外源基因的稳定存在，避免因传代培养导致基因丢失。
ffluc（萤火虫荧光素酶）
是一种报告基因，其表达产物（荧光素酶）可催化荧光素氧化并产生生物荧光。
应用场景：
体内成像：通过活体动物成像系统检测荧光信号，追踪细胞在动物体内的分布、增殖或迁移（如肿瘤转移研究）。
体外检测：通过酶标仪定量检测荧光强度，分析基因表达水平、药物处理效果等。
RAW264.7-Puro+ffluc 稳转株的构建流程
载体构建
构建含有ffluc 基因和Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、逆转录病毒载体等）。
载体需包含启动子（如 CMV 启动子）以驱动 ffluc 基因的表达。
细胞转染
将重组质粒导入 RAW264.7 细胞，常用方法包括病毒感染（慢病毒 / 逆转录病毒）、脂质体转染或电穿孔。
病毒感染优势：适用于难转染的细胞类型，整合效率高，外源基因表达稳定。
筛选与单克隆化
在培养基中添加Puro 抗生素，未成功转染的细胞死亡，存活细胞为初步筛选的稳转株。
通过有限稀释法或流式细胞术进行单克隆筛选，获得单个细胞来源的纯稳转株，确保基因表达均一性。
鉴定与验证
分子水平：通过 PCR 检测 ffluc 基因是否整合到细胞基因组中。
功能水平：通过荧光素酶活性检测（如加入荧光素底物后测荧光强度）验证 ffluc 的表达。
应用领域
免疫与炎症研究
追踪巨噬细胞在炎症模型中的浸润和活化，例如在关节炎、脓毒症动物模型中通过荧光成像观察细胞分布。
肿瘤研究
构建荷瘤小鼠模型：将稳转株注射至小鼠体内，利用 ffluc 荧光监测肿瘤生长、转移及药物治疗效果（如化疗药物对巨噬细胞的影响）。
药物筛选
基于 ffluc 的荧光强度变化，高通量筛选调节巨噬细胞功能的小分子化合物（如促炎或抗炎药物）。
基因功能研究
结合 RNA 干扰（shRNA）或 CRISPR-Cas9 技术，敲低 / 敲除目的基因后，通过 ffluc 信号变化分析基因对巨噬细胞行为的影响。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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