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Calu-3-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
Calu-3-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | Calu-3-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2310 |
中文名称 | ffluc 标记的 Calu-3 稳转株 |
Lot number | Calu-3-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
Calu-3-Puro+ffluc 稳转株概述
Calu-3 细胞是一种人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系，来源于肺腺癌，具有上皮细胞形态，常用于肺癌研究、药物筛选及细胞生物学研究。稳转株（稳定转染细胞株）是通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使其能在传代过程中持续表达目标蛋白的细胞群体。
关键组件说明：
Puro：通常指嘌呤霉素（Puromycin），是一种抗生素，用于稳转株筛选。含有 Puro 抗性基因的细胞可在嘌呤霉素存在的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰。
ffluc：即萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase），是一种报告基因，其表达产物可催化荧光素发光，通过荧光成像技术（如活体成像）定量检测细胞数量、分布及基因表达水平，常用于体内外追踪细胞行为（如肿瘤生长、转移）。
构建流程与技术特点
1. 构建流程
载体设计：构建包含 ffluc 基因和 Puro 抗性基因的重组质粒（如慢病毒载体、质粒载体），确保两者共表达（通常由同一启动子驱动或通过 IRES 元件实现双顺反子表达）。
转染 / 感染：通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将载体导入 Calu-3 细胞。
筛选与克隆化：使用嘌呤霉素培养基筛选存活细胞，经有限稀释法或流式细胞术（FACS）单克隆化，获得稳定表达 ffluc 的单细胞克隆。
鉴定：通过 Western blot 检测荧光素酶蛋白表达，通过荧光成像验证发光强度，确保稳定性和均一性。
2. 技术优势
持续表达：外源基因整合至基因组，传代后不丢失，适用于长期实验（如动物模型追踪）。
定量检测：ffluc 发光信号强度与细胞数量呈线性关系，可通过活体成像系统（如 IVIS）实时监测肿瘤生长、转移或药物疗效。
操作便捷：嘌呤霉素筛选流程成熟，单克隆化后细胞株稳定性高。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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