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HCCC-9810-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
HCCC-9810-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HCCC-9810-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2295 |
中文名称 | ffluc 标记的 HCCC-9810 稳转株 |
Lot number | HCCC-9810-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

HCCC - 9810 细胞系背景:HCCC - 9810 细胞是源自一位女性肝胆管细胞癌患者的人肝内胆管癌细胞。其呈上皮细胞样,染色体模式数为 71,染色体数目变动范围在 22 - 117 之间,倍增时间为 20.4 小时,AFP、CEA 和 CA19 - 9 的分泌水平低,在裸鼠中的成瘤率为 20%。
稳转株构建原理:通过将含有目的基因(如 ffluc)以及抗性基因(如 Puro,嘌呤霉素抗性基因)的外源 DNA 克隆到载体上,然后将重组载体转染至 HCCC - 9810 细胞中,并使其整合到细胞的染色体中。这样,目的基因就能够随细胞分裂稳定传递下去。之后,利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源 DNA 并表达出抗性蛋白的细胞才能存活,从而得到稳定表达目的基因的 HCCC - 9810 - Puro + ffluc 稳转株。
Puro 和 ffluc 的作用:Puro 即嘌呤霉素,是一种抗生素,在稳转株构建过程中作为筛选标记。只有携带 Puro 抗性基因的细胞,也就是成功转入外源 DNA 的 HCCC - 9810 细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活。ffluc 通常指萤火虫荧光素酶(firefly luciferase),它是一种报告基因。在细胞中表达后,能够催化荧光素底物发生反应产生荧光。通过检测荧光的强度和分布,可以对细胞的活动、基因表达水平等进行定性或定量分析,常用于研究基因调控、细胞信号转导、药物筛选等领域,也可用于在动物模型中对肿瘤细胞的生长、转移等进行活体成像监测。
应用领域:在癌症研究中,可利用该稳转株研究肝胆管细胞癌相关基因的功能、信号通路,以及筛选针对 HCCC - 9810 细胞的抗癌药物等。由于 ffluc 的存在,还可以在动物体内实时追踪肿瘤细胞的生长、转移和对治疗的反应,为肿瘤的基础研究和药物研发提供重要的工具。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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