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RPMI-8226-GFP-Puro+ffluc单克隆株
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详细内容
RPMI-8226-GFP-Puro+ffluc单克隆株
英文名称 | RPMI-8226-GFP-Puro+ffluc monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2316 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 RPMI-8226 单克隆株 |
Lot number | RPMI-8226-31A8S |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆株; (5)单克隆株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

RPMI-8226-GFP-Puro+ffluc 单克隆株概述
RPMI-8226 是一种人多发性骨髓瘤细胞系,常用于肿瘤生物学、药物筛选等研究。通过基因工程改造后,该细胞系被稳定转染了 GFP(绿色荧光蛋白)、Puro(嘌呤霉素抗性基因) 和 ffluc(萤火虫荧光素酶),形成 单克隆株(即由单个细胞增殖形成的纯细胞群体)。以下是该细胞株的关键特性和应用场景:
一、关键组成与功能
组件 功能描述
GFP 荧光标记,用于细胞成像、示踪及流式细胞术分选,便于观察细胞在体内外的分布和动态。
Puro 嘌呤霉素抗性基因,用于筛选成功转染的细胞(未转染细胞会被嘌呤霉素杀死)。
ffluc 萤火虫荧光素酶,通过荧光素底物发光,可用于活体生物发光成像,监测肿瘤生长、转移或药物疗效。
二、构建流程(简要)
载体构建:将 GFP、Puro 和 ffluc 基因插入到同一质粒载体中,形成重组表达载体。
细胞转染:通过脂质体转染、电穿孔等方法将载体导入 RPMI-8226 细胞。
单克隆筛选:利用嘌呤霉素抗性筛选存活细胞,再通过有限稀释法或流式细胞术分离单个细胞,培养形成单克隆株。
鉴定验证:通过荧光显微镜观察 GFP 表达、 luciferase 活性检测 ffluc 功能,确保基因稳定表达。
三、主要应用场景
1. 肿瘤研究
体内成像:将细胞接种到免疫缺陷小鼠(如裸鼠)体内,通过生物发光成像(BLI)实时监测肿瘤生长、转移灶形成及药物治疗效果(如化疗或靶向药物的抗肿瘤活性)。
细胞示踪:利用 GFP 荧光标记,在荧光显微镜下观察细胞在体外共培养体系或体内微环境中的迁移、侵袭能力。
2. 药物筛选与药效评估
高通量筛选:基于 ffluc 的发光信号强度反映细胞存活率,可快速评估候选药物的细胞毒性(信号减弱提示细胞死亡)。
联合治疗研究:结合 GFP 标记的细胞形态观察和 ffluc 的定量分析,研究联合用药对肿瘤细胞增殖的协同抑制作用。
3. 机制研究
基因功能分析:通过该单克隆株稳定表达的报告基因,研究特定基因(如与耐药性、凋亡相关的基因)对肿瘤细胞行为的影响。
肿瘤微环境研究:将 GFP 标记的肿瘤细胞与免疫细胞(如 T 细胞)共培养,分析细胞间相互作用对肿瘤进展的调控机制。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:RPMI-8226-GFP-Puro+ffluc单克隆株,ffluc,和,GFP,双标的,RPMI-8226,单克隆株,RPMI-8226-GFP-Puro+ffluc,monoclonal,stable,cell,line















