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ID8-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
ID8-GFP-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | ID8-GFP-Puro+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-M1266 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 ID8 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

一、背景与组成
1. 基础细胞系:ID8 细胞
来源:通常为小鼠卵巢癌细胞系,常用于卵巢癌研究(如肿瘤发生、转移机制、药物筛选等)。
特性:具有恶性增殖能力,可在免疫缺陷小鼠中形成实体瘤,模拟卵巢癌的体内生长过程。
2. 标记基因与筛选元件
GFP(绿色荧光蛋白):
作为报告基因,表达后使细胞发出绿色荧光,便于通过荧光显微镜、流式细胞术(FACS)或活体成像技术实时追踪细胞位置、形态及增殖情况。
Puro(嘌呤霉素抗性基因):
作为筛选标记,用于稳转株构建过程中筛选成功整合外源基因的细胞(含 Puro 抗性的细胞可在嘌呤霉素存在的培养基中存活,未整合的细胞被淘汰)。
ffluc(萤火虫荧光素酶基因):
表达荧光素酶,在底物(如荧光素)存在下可产生生物发光信号,常用于活体动物体内成像,监测肿瘤生长、转移或药物疗效(信号强度与细胞数量呈正相关)。
二、关键特性
特性 说明
荧光双标记 同时表达 GFP(可见光激发)和 ffluc(生物发光),支持多模态成像分析。
稳定遗传 外源基因(GFP、Puro、ffluc)通过载体整合至细胞基因组,可在传代中稳定表达。
体内外适用性 - 体外:荧光显微镜观察、细胞分选、增殖曲线测定等。
- 体内:小鼠移植瘤模型,实时监测肿瘤发展。
药物筛选优势 Puro 抗性便于通过药物压力维持稳转株的纯度,避免未转染细胞过度生长。
三、主要应用场景
1. 肿瘤生物学研究
肿瘤生长与转移监测:
向小鼠接种 ID8-GFP-Puro+ffluc 细胞后,通过活体成像系统定期检测 ffluc 信号,量化肿瘤体积变化;GFP 可用于肿瘤组织切片的荧光染色分析,观察细胞分布。
转移灶追踪:通过尾静脉注射等方式构建转移模型,利用双标记特性定位原发灶与转移灶。
2. 药物疗效评估
在荷瘤小鼠中测试抗癌药物时,ffluc 信号强度可反映肿瘤细胞数量变化,快速评估药物对肿瘤生长的抑制效果。
GFP 标记可辅助流式细胞术分析肿瘤细胞凋亡或周期变化(如与 Annexin V-FITC 等染料联用)。
3. 细胞示踪与免疫研究
将标记细胞与免疫细胞(如 T 细胞)共培养或共移植,通过荧光信号分析细胞间相互作用(如免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤效率)。
4. 基因功能研究
若 ID8 细胞中还过表达 / 敲低其他目的基因,可结合双标记特性,研究该基因对肿瘤细胞增殖、迁移等表型的影响。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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