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TM3-BSD+ffluc单克隆株
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详细内容
TM3-BSD+ffluc单克隆株
产品名称 | TM3-ffluc2-BSD 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-M1251 |
中文名称 | ffluc2 标记的 TM3 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆细胞株; (5)单克隆细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM / F12 (1 : 1) + 5% HS + 2.5% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

TM3 细胞背景:TM3 细胞是小鼠睾丸间质细胞,具有特定的生理功能和特性,可用于研究睾丸间质细胞的生物学行为、激素分泌调控、细胞信号转导等方面,也可用于研究相关疾病的发病机制和药物筛选等。在正常生理状态下,TM3 细胞能够合成和分泌睾酮等雄性激素,对雄性生殖系统的发育和功能维持起着重要作用。
相关标记含义
BSD:通常指的是杀稻瘟菌素(Blasticidin)抗性基因。在细胞培养中,加入杀稻瘟菌素可以筛选出成功转染了含有 BSD 基因载体的细胞,只有携带 BSD 抗性基因的细胞才能在含有杀稻瘟菌素的培养基中存活,从而实现对特定细胞的筛选和富集。
ffluc:一般指的是萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)基因。ffluc 基因编码的荧光素酶可以催化荧光素底物发生氧化反应,产生生物荧光。通过检测荧光的强度和分布,可以对细胞的活动、基因表达、信号通路等进行定性和定量分析,常用于研究基因调控、细胞代谢、药物作用靶点等领域。
构建与筛选过程
基因编辑:首先,利用基因编辑技术,如 CRISPR/Cas9 等,将 BSD 基因和 ffluc 基因导入 TM3 细胞中。这一过程需要构建含有目的基因的表达载体,并将其导入细胞内,使目的基因整合到细胞基因组中。
细胞筛选:在转染后的细胞群体中,利用杀稻瘟菌素进行筛选,只有成功整合了 BSD 基因并表达出抗性蛋白的细胞才能在含有杀稻瘟菌素的培养基中存活,从而得到初步筛选的细胞群体。
单克隆化:通过有限稀释法或细胞克隆环等方法,将初步筛选得到的细胞进一步分离、培养,获得单个细胞形成的克隆。然后对这些单克隆细胞进行检测,筛选出同时稳定表达 ffluc 基因且具有良好生物学特性的单克隆株,即 TM3-BSD+ffluc 单克隆株。
应用领域
细胞生物学研究:可用于研究 TM3 细胞的增殖、分化、凋亡等基本生物学过程,以及细胞信号通路的激活和调控机制。例如,通过检测 ffluc 的表达变化,观察细胞在受到不同刺激或药物处理后的反应,进而揭示相关信号通路的作用机制。
药物研发:作为药物筛选的模型细胞株,用于评估药物对 TM3 细胞的作用效果和机制。可以通过检测 ffluc 荧光强度的变化,快速筛选出对细胞功能有影响的药物,并进一步研究药物的作用靶点和药理作用机制,为雄性生殖系统相关疾病的药物研发提供重要的实验依据。
基因表达调控研究:借助 ffluc 基因作为报告基因,研究 TM3 细胞中特定基因的表达调控机制。通过构建含有不同调控元件的 ffluc 表达载体,转染到 TM3-BSD+ffluc 单克隆株中,分析荧光素酶的表达水平,从而确定基因的启动子活性、转录因子结合位点等,深入了解基因表达的调控规律。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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