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EMT6-BSD+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:04
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详细内容
EMT6-BSD+ffluc稳转株
产品名称 | EMT6-BSD+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-M1281 |
中文名称 | ffluc 标记的 EMT6 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
关键信息解析
标记基因与报告基因
BSD（Blasticidin）：
即杀稻瘟菌素，是一种抗生素，在此作为筛选标记。稳转株通过转染携带 BSD 抗性基因的质粒，可在含 BSD 的培养基中存活，便于筛选成功转染的细胞。
ffluc（Firefly Luciferase，萤火虫荧光素酶）：
是一种报告基因，其表达产物可催化荧光素发光，通过生物发光成像（BLI）技术，可实时、非侵入性地监测细胞在体内外的增殖、迁移、转移等动态过程，常用于肿瘤模型构建、药效评估等。
构建流程
质粒构建：将 ffluc 基因与 BSD 抗性基因构建到同一表达载体（如慢病毒载体、质粒载体）中。
转染：通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）等方法，将载体导入 EMT6 细胞。
筛选与鉴定：使用 BSD 培养基筛选出稳定表达外源基因的单克隆细胞，通过 PCR、Western blot 验证 ffluc 基因的表达，通过荧光成像检测发光强度。
应用场景
肿瘤研究：
建立小鼠乳腺癌原位模型，通过 ffluc 发光信号追踪肿瘤生长、转移及对治疗的响应（如化疗、靶向药物）。
研究肿瘤细胞与宿主微环境的相互作用。
药物开发：
快速评估药物的体内抗肿瘤效果（如肿瘤体积变化、转移灶数量）。
高通量筛选潜在化合物的疗效。
基础生物学研究：
分析基因表达与肿瘤恶性表型（如侵袭、迁移）的关联。
优势与局限性
优势：
可长期稳定表达 ffluc，避免瞬时转染的表达衰减问题。
非侵入性成像技术可减少实验动物数量，符合 3R 原则（替代、减少、优化）。
局限性：
需确保 ffluc 表达不影响 EMT6 细胞的原有生物学特性（如增殖速率、转移能力）。
体内成像受组织穿透性限制（发光信号在深层组织中的强度可能减弱）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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