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TM3-GFP-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:04
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详细内容
TM3-GFP-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | TM3-ffluc2-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-M1252 |
中文名称 | ffluc2、GFP 双标的 TM3 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）稳转细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM / F12 (1 : 1) + 5% HS + 2.5% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
TM3-GFP-Puro+ffluc 稳转株概述
TM3 细胞是源自小鼠睾丸间质细胞的永生化细胞系，常用于内分泌研究、细胞生物学及药物筛选等领域。稳转株（稳定转染细胞株）是通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使其能够持续表达目标蛋白的细胞群体。
关键组件解析
GFP（绿色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，用于实时观察细胞形态、定位及转染效率，便于通过荧光显微镜或流式细胞术进行可视化追踪。
应用场景：研究目的基因的亚细胞定位、细胞增殖或迁移过程。
Puro（嘌呤霉素）
作用：筛选标记基因，赋予细胞对嘌呤霉素的抗性。在稳转株构建过程中，未成功整合外源基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，从而筛选出稳定表达目标基因的细胞株。
ffluc（萤火虫荧光素酶）
功能：作为生物发光报告基因，通过荧光素酶检测系统定量分析基因表达水平或细胞活性。
应用场景：体内成像（如小鼠肿瘤模型）、药物代谢分析或信号通路研究，可非侵入性监测细胞在活体中的动态变化。
构建流程与技术特点
构建步骤
载体设计：将 GFP、Puro 抗性基因和 ffluc 基因插入到同一质粒载体中，通常采用慢病毒或逆转录病毒载体以提高整合效率。
细胞转染：通过病毒感染或电穿孔等方法将载体导入 TM3 细胞。
筛选与扩增：使用嘌呤霉素培养基筛选存活细胞，经有限稀释法或单克隆挑选获得纯克隆稳转株。
鉴定验证：通过荧光显微镜观察 GFP 表达、 luciferase 活性检测 ffluc 功能，以及 Western blot 验证目标基因蛋白水平。
技术优势
双报告系统：GFP 用于细胞可视化，ffluc 用于定量分析，结合两者可实现从体外到体内的多维度研究。
稳定性：外源基因整合至基因组，可长期传代并维持表达，避免瞬时转染的表达波动。
应用灵活性：适用于体外功能研究（如激素分泌、信号通路）和体内动物模型（如肿瘤移植、药物分布）。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：TM3-GFP-Puro+ffluc稳转株,ffluc2,GFP,双标的,TM3,稳转细胞株,TM3,稳转细胞株
