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4T1-Puro+OVA(OPT)稳转株
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详细内容
4T1-Puro+OVA(OPT)稳转株
产品名称 | 4T1-Puro+OVA(OPT) 稳转株 |
产品货号 | XY-M1366 |
中文名称 | OVA(OPT) 过表达 4T1 稳转株 |
Lot number | 4T1-51A6P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞系背景
起源:4T1 是一种源自 BALB/c 小鼠乳腺组织的乳腺癌细胞系,具有高度侵袭性和肿瘤原性,常用于乳腺癌相关研究,尤其是三阴性乳腺癌(TNBC)的研究,因为它不表达雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和表皮生长因子受体 2(HER2),与人类转移性三阴性乳腺癌的特征相似,且在小鼠体内具有很强的转移能力,可转移至肺、肝、淋巴结、脑和骨等部位。
稳转株构建相关
抗性筛选标记:“Puro” 指嘌呤霉素(puromycin),在构建稳转株过程中,载体上携带嘌呤霉素抗性基因。转染后,用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了载体(包含目的基因和抗性基因)的细胞才能在含嘌呤霉素的培养基中存活,从而筛选出稳定表达目的基因的细胞株。
目的基因及优化:“OVA” 可能指卵清蛋白(Ovalbumin),是一种常用的抗原蛋白等。“OPT” 可能是经过优化(optimized)的意思,比如通过 Opt Gene 等基因优化工具对 OVA 基因进行优化,使其在宿主细胞中能够更高效地表达,优化方式可能包括密码子优化、去除一些不利于表达的序列信号(如隐蔽剪接位点、RNA 不稳定序列等)、减少 RNA 二级结构等,以提高翻译效率和克隆过程的便利性等。
应用方面
肿瘤免疫研究:由于表达优化后的 OVA 抗原,可用于研究肿瘤抗原特异性免疫反应。例如,可用于探讨机体对表达 OVA 抗原的肿瘤细胞的免疫识别、免疫激活机制以及评估免疫治疗方法(如疫苗接种、免疫细胞治疗等)对该肿瘤细胞的作用效果等。
基因表达与调控研究:作为稳转株,可用于研究 OVA 基因在 4T1 细胞中的稳定表达特性以及相关的基因表达调控机制,也可以作为模型来研究与 OVA 表达相关的信号通路等。
培养与维护
4T1 细胞本身是贴壁生长细胞,培养条件一般为 5% CO₂、37°C 的环境。在培养 4T1-Puro+OVA (OPT) 稳转株时,需要在培养基中添加适量的嘌呤霉素(具体浓度需根据前期实验确定)以维持对稳转细胞的筛选压力,保证细胞持续表达目的基因。同时,要注意细胞的生长状态,及时传代,避免细胞过度生长导致老化或死亡等问题。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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