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4T1-Puro+FGFR2(h)稳转株
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详细内容
4T1-Puro+FGFR2(h)稳转株
产品名称 | 4T1-Puro+FGFR2(h) 稳转株 |
产品货号 | XY-M1388 |
中文名称 | FGFR2(h) 过表达 4T1 稳转株 |
Lot number | 4T1-51B6P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞系背景
4T1 细胞系:是从 Balb/c 小鼠乳腺组织衍生而来的乳腺癌细胞系。该细胞系具有高度侵袭性和转移性,常被用于乳腺癌相关的基础研究和药物开发等领域,特别是在研究肿瘤转移机制以及评估抗癌药物疗效等方面应用广泛。
稳转株构建相关
Puro 抗性:“Puro” 指嘌呤霉素(puromycin),在构建稳转株过程中,载体带有嘌呤霉素抗性基因。当将目标基因的载体转染到 4T1 细胞后,用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了载体(包含抗性基因和目标基因)的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而筛选出稳定表达目标基因的细胞株,即 4T1-Puro 细胞株是经过嘌呤霉素筛选得到的 4T1 稳转细胞株基础部分。
FGFR2(h):FGFR2 是成纤维细胞生长因子受体 2,(h)通常表示人类(human)。这意味着该稳转株是在 4T1 细胞中稳定表达人类 FGFR2 基因。可能是通过基因工程技术,将人类 FGFR2 基因克隆到带有嘌呤霉素抗性的载体上,然后将重组载体转染到 4T1 细胞中,并经过嘌呤霉素筛选等一系列步骤,最终获得了 4T1-Puro+FGFR2 (h) 稳转株,使 4T1 细胞能够稳定表达人类 FGFR2 蛋白。
应用
基因功能研究:可用于研究人类 FGFR2 基因在 4T1 细胞背景下的功能,例如对细胞增殖、分化、迁移、侵袭等生物学行为的影响。
药物研发:
作为模型细胞株,用于筛选针对 FGFR2 及其相关信号通路的抗癌药物。因为 4T1 细胞具有肿瘤细胞特性且稳定表达人类 FGFR2,能更贴近人体肿瘤细胞情况来评估药物对 FGFR2 的作用效果,包括药物的抑制活性、细胞毒性等。
研究药物作用机制,通过观察药物处理该稳转株后细胞内相关信号通路的变化等,深入了解药物如何通过作用于 FGFR2 来影响肿瘤细胞的生物学功能。
肿瘤转移研究:结合 4T1 细胞本身的高转移性特点,研究 FGFR2 对肿瘤转移过程的影响,例如是否影响 4T1 细胞向其他组织器官的迁移和定植等。
培养与筛选
培养条件:通常以 RPMI-1640 培养基为基础,添加 10% 胎牛血清等成分组成完全培养基进行培养,培养环境为 37℃、95% 空气和 5% 二氧化碳。但由于该细胞系生长特性,培养时需注意细胞密度,一般不建议让细胞达到 100% 汇合,可在 80% 左右进行传代等操作。
筛选维持:在构建过程中及后续培养中,需要用嘌呤霉素进行筛选和维持。构建时用嘌呤霉素筛选出成功转染的细胞;在后续培养中,为保持细胞对载体的稳定携带和目标基因的稳定表达,培养基中需持续添加适当浓度的嘌呤霉素(具体浓度需根据预实验确定),以去除可能出现的未携带载体的细胞。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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