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CHO-K1-GFP-Puro+EGFR(h,FL)单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:04
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详细内容
CHO-K1-GFP-Puro+EGFR(h,FL)单克隆株
英文名称 | CHO-K1-GFP-Puro+EGFR(h,FL) monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-O1117 |
中文名称 | EGFR 过表达 CHO-K1 单克隆株 |
Lot number | CHO-K1-32B7S |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆株； （5）单克隆株质检（COA）。 |
完全培养基 | F12K + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
细胞来源与背景
CHO-K1 细胞背景：CHO-K1 细胞是中国仓鼠卵巢细胞（CHO 细胞）的一个亚克隆，源自成年中国仓鼠卵巢组织切片。它是一种常用的哺乳动物细胞系，具有生长快、易于培养、蛋白表达能力较强等特点，广泛应用于生物制药领域，如重组蛋白、单克隆抗体等的生产。
基因编辑与特性
GFP 表达：该细胞株稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）。GFP 是一种常用的报告基因，在荧光显微镜下可以发出绿色荧光，便于对细胞进行可视化观察、追踪以及筛选等操作。例如，在细胞培养过程中，可以通过荧光显微镜快速确定表达 GFP 的细胞，用于研究细胞的生长、分化、迁移等过程，或者在构建稳定细胞株的过程中，帮助筛选出成功转染的细胞克隆。
Puromycin 抗性：细胞株含有嘌呤霉素（Puromycin）抗性标记。嘌呤霉素是一种抗生素，能够抑制蛋白质合成，从而杀死未导入抗性基因的细胞。在细胞培养过程中，向培养基中添加嘌呤霉素，可以筛选出成功转染并稳定表达目的基因（如 GFP 和 EGFR 相关基因）的细胞株，因为只有含有 Puromycin 抗性基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活。
EGFR 基因表达：表达人表皮生长因子受体（EGFR）的全长（FL）基因，这里的 “h” 表示人类（human）。EGFR 是一种重要的跨膜受体酪氨酸激酶，在细胞的增殖、分化、凋亡等过程中发挥着重要作用。在该细胞株中表达 EGFR (h,FL)，可能用于研究 EGFR 的生物学功能、信号转导途径，或者用于筛选针对 EGFR 的药物、研究药物对 EGFR 及其相关信号通路的影响等。
应用领域
药物研发：
可用于筛选能够抑制 EGFR 活性的小分子药物、抗体药物等。通过观察药物对表达 EGFR 的细胞株的生长、增殖、信号传导等方面的影响，评估药物的有效性和作用机制。
研究药物对 EGFR 突变体的作用。如果对该细胞株进行进一步的基因编辑，引入 EGFR 的突变，可以模拟临床中常见的 EGFR 突变情况，用于研发针对特定突变的靶向药物。
基础生物学研究：有助于深入了解 EGFR 信号通路的调控机制。通过对该细胞株进行各种实验操作，如敲低或过表达 EGFR 及其相关信号分子、添加信号通路抑制剂或激活剂等，研究 EGFR 信号通路在细胞生理和病理过程中的作用。
细胞生物学研究：GFP 的表达使得该细胞株可作为模型细胞，用于研究细胞的各种生物学过程，如细胞周期、细胞凋亡、细胞迁移等。可以通过荧光成像技术实时观察细胞的动态变化。
培养与维护
培养条件：一般来说，CHO-K1 细胞的培养条件为 37℃、5% 二氧化碳的环境。培养基通常使用含有胎牛血清（FBS）、营养物质、抗生素等的 DMEM 培养基等，但对于该特定的 CHO-K1-GFP-Puro+EGFR (h,FL) 单克隆株，可能需要根据其特性和实验要求进行优化。例如，由于其含有 Puromycin 抗性，在筛选和维持细胞株时，培养基中需要添加适量的嘌呤霉素（如 5 µg/ml 等，具体浓度可能因实验而异），而在细胞复苏、传代等某些操作过程中，可能需要先在不含嘌呤霉素的培养基中进行短暂培养。
传代与保存：当细胞生长达到一定密度时，需要进行传代操作，以维持细胞的生长和活性。传代比例一般在 1:10 到 1:20 左右，每周进行传代。细胞株可以通过冻存的方式进行保存，通常在液氮中保存，冻存时需要使用含有保护剂（如 DMSO）的冻存液，以防止细胞在低温下受到损伤。
总之，CHO-K1-GFP-Puro+EGFR (h,FL) 单克隆株是一种具有特定基因表达特征的细胞模型，在药物研发、基础生物学研究等领域具有重要的应用价值，但在使用过程中需要根据其特性进行合理的培养、维护和实验设计。如果你还想了解关于该细胞株的其他信息，或者有具体的实验需求和问题，可以进一步咨询相关专业人士或查阅更多的文献资料。
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