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CHO-K1-GFP-Puro+FAP稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:04
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详细内容
CHO-K1-GFP-Puro+FAP稳转株
英文名称 | CHO-K1-GFP-Puro+FAP polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-O1118 |
中文名称 | FAP 过表达 CHO-K1 稳转株 |
Lot number | CHO-K1-36C5P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | F12K + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
细胞株背景
CHO-K1 细胞：中国仓鼠卵巢（CHO）细胞是生物制药中常用的宿主细胞，具有耐受剪切力和渗透压能力相对较强、整合外源基因后细胞稳定、重组基因能高效扩增和表达、目的蛋白易提取等优点。CHO-K1 是 CHO 细胞的一种亚型，来源清晰，如 ATCC CCL-61、ECACC 85051005 等是其常见的来源编号。
相关基因和标记
GFP：即绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein）。在该稳转株中，细胞稳定表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）。GFP 可作为标记物，便于通过荧光显微镜观察细胞、利用流式细胞术筛选细胞等，帮助研究人员追踪细胞、观察细胞的生长状态、迁移情况以及用于细胞分选等操作。
Puro：嘌呤霉素（Puromycin）。这是一种抗生素，在细胞转染过程中，含 Puro 抗性基因的表达载体被导入细胞。只有成功转染并整合了该载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活，从而实现对转染细胞的筛选。一般培养该细胞时，培养基中会添加 5 µg/ml 的嘌呤霉素来维持筛选压力。
FAP：可能是指成纤维细胞活化蛋白（Fibroblast Activation Protein）。将 FAP 基因转入 CHO-K1 细胞并使其稳定表达，可能是为了研究 FAP 的功能、制备针对 FAP 的抗体、开发以 FAP 为靶点的药物等。例如，FAP 在某些肿瘤微环境中高表达，相关研究可能涉及肿瘤的诊断、治疗等领域。
构建方法
通常采用基因工程技术构建，一般步骤如下：
构建含 GFP、Puro 抗性基因以及 FAP 基因的表达载体，该载体需有合适的启动子、终止子等元件以保证基因的正常表达。
用构建好的表达载体转染 CHO-K1 细胞，可采用脂质体转染、电穿孔等方法。
转染后，在含有嘌呤霉素的培养基中进行筛选，未成功转染的细胞会因对嘌呤霉素敏感而死亡，存活下来的细胞即为成功转染并具有 Puro 抗性的细胞。
进一步通过单细胞克隆等技术，挑选出稳定表达 GFP 和 FAP 的单克隆细胞，从而获得 CHO-K1-GFP-Puro+FAP 稳转株。
培养条件
一般使用 DMEM 培养基（含 L - 谷氨酰胺、4.5 g/L 葡萄糖和丙酮酸钠），并添加 10% 热灭活的胎牛血清（FBS）、1% 青霉素 - 链霉素，以及 5 µg/ml 的嘌呤霉素，在 37℃、5% CO₂的培养箱中培养。传代时，用胰酶 / EDTA 消化细胞，按 1:10 到 1:20 的比例每周进行传代，且传代次数一般不超过 16 次，以保证细胞的特性稳定。
应用领域
药物研发：可用于筛选针对 FAP 的小分子药物、抗体药物等，观察药物对表达 FAP 细胞的作用机制、疗效等。例如，若 FAP 与肿瘤生长、转移等过程相关，可利用该细胞株筛选能抑制 FAP 功能或与 FAP 结合的药物，为肿瘤治疗药物开发提供模型。
生物学研究：帮助研究 FAP 在细胞生理、病理过程中的功能，以及 FAP 与其他分子的相互作用等。GFP 的存在便于实时观察细胞中 FAP 的表达位置、表达量变化等情况。
细胞示踪研究：由于表达 GFP，可在体内外对细胞进行示踪，研究细胞的迁移、定植等行为。比如在肿瘤研究中，将该细胞株注入动物体内，通过荧光观察来了解表达 FAP 的细胞在体内的分布和转移情况。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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