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过氧亚硝基阴离子(ONOO-)检测试剂盒-绿色荧光
价格:¥ 100T/1600元;200T/2700元
品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/22 8:30:56
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详细内容
过氧亚硝基阴离子(ONOO-)检测试剂盒-绿色荧光
产品货号:XY9-470568
产品规格及价格:100T/1600元;200T/2700元
产品简介:
过氧亚硝基阴离子(ONOO-)检测试剂盒是一种利用荧光探针O71进行过氧亚硝基阴离子检测的试剂盒。O71探针本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,在过氧亚硝基阴离子存在的条件下,O71探针被氧化生成荧光物质O71F,O71F的绿色荧光强度与细胞内过氧亚硝基阴离子水平成正比,检测O71F绿色荧光强度就可以知道细胞内过氧亚硝基阴离子的水平。
在激发波长488 nm,发射波长516 nm附近,使用荧光酶标仪、荧光分光光度计、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等检测O71F 荧光强度,从而测定细胞内过氧亚硝基阴离子水平。
O71荧光探针对过氧亚硝基阴离子(ONOO-)有较高的选择性,但是也会与活性羟基反应。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。
产品特点:
1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测或激光共聚焦显微镜直接拍照分析;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
5.对于药物作用时间较短(小于 2 小时)的细胞,可以先标记探针,后用药物刺激细胞。对于药物作用时间较长(6 小时以上)的细胞,先用相应的药物刺激细胞,后标记探针。
6.O71 染色液为 DMSO 溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
7.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。
8.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
9.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
10.酚红对 O71 荧光探针的检测有干扰,需避免。
11.染色后立即进行分析。
12.以下步骤仅做为参考,稀释比例和孵育时间可根据实际情况来调整。比如,对于某些细胞,如果发现未被刺激的阴性对照细胞荧光也比较强,可降低探针浓度。如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱,可升高O71 探针浓度,以提高检测的灵敏度。另外,探针装载的时间也可以根据情况在 15-60 分钟内适当进行调整,孵育温度在 4 -37 ℃ ℃内调整。
13.必须使用荧光检测专用的黑色 96 孔板。
1. 探针染色工作液配制:
根据样本数量,用 HBSS 将 O71 荧光染料 100-500 倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞探针标记
2.1 对于贴壁细胞,可以进行原位标记
1)培养皿/培养板准备细胞样本。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量 37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育 20 分钟~
30 分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)移除染色液,用 PBS(pH7.4)洗涤细胞 3 次。
4)荧光显微镜(含合适滤片)或流式细胞仪、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射波长为 488 / 516 nm。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用 37℃预热的探针工作液 100-200 µl 重悬细胞,于生长状态下孵育 20 分钟~30 分钟(具体时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)离心,吸除染色液,加入 PBS(pH7.4)重悬细胞,洗涤 3 次。
4)流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为 488 / 516 nm。
3.检测:
对于原位标记探针的样品可以用荧光酶标仪检测,或者荧光显微镜,激光共聚焦显微镜直接拍照分析(需要有相关的荧光强度分析软件)。
或收集细胞后标记探针然后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。
使用 488 nm 激发波长,516 nm 发射波长,实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。
过氧亚硝基阴离子浓度高则荧光强度强。
O71F 的荧光光谱和 FITC 非常相似,可以用 FITC 的参数设置进行检测。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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