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一氧化氮检测试剂盒（NO检测试剂盒）（红色荧光）
价格：￥ 100T/1600元；200T/2700元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:46:42
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详细内容
一氧化氮检测试剂盒（NO检测试剂盒）（红色荧光）
产品货号：XY9-460632
产品规格及价格：100T/1600元；200T/2700元
产品简介：
一氧化氮检测试剂盒是一种利用新型荧光探针O38进行细胞内一氧化氮定性检测的试剂盒。本试剂盒中的O38 NO探针为红色荧光的一氧化氮探针，具有510 nm / 610 nm的最大激发/发射波长。
O38 NO探针在细胞中一氧化氮存在的条件下，被氧化生成红色荧光物质，红色荧光强度与细胞内一氧化氮水平成正比，检测O38产物的荧光强度就可以知道细胞内一氧化氮的水平。
在激发波长510 nm，发射波长610 nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等检测O38产物的荧光强度，从而测定细胞内一氧化氮水平。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的一氧化氮的定性检测。
活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、一氧化氮（NO，Nitric oxide）、超氧阴离子(•O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO• ，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B)，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C)，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D)，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E)，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
O系列NO探针具有多种颜色可以选择，除了本试剂盒的红色荧光探针，还可以提供蓝色、绿色、深红色荧光的NO检测试剂盒。
可以为您提供各种细胞样本、切片样本、组织样本的活性氧、活性氮检测试剂盒产品。
可以为您提供总活性氧、总活性氮和各种亚型的活性氧/活性氮的检测试剂盒产品。
可以为您提供各种绿色、红色、蓝色、深红色的活性氧/活性氮检测试剂盒产品。
产品特点：
1.使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测或激光共聚焦显微镜直接拍照分析；
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.原位检测必须使用荧光检测专用的黑色透明底 96 孔细胞培养板。
6.以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整或参考文献。
7.探针标记的时间也可以根据情况在 15-60 分钟内适当进行调整。
8.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下染色操作条件仅供参考。请根据实际样本情况调整或参考文献。
9.酚红对 O38 荧光探针的检测有轻微干扰，需尽可能避免。
10.以下步骤仅做为参考，稀释比例和孵育时间可根据实际情况来调整。比如，对于某些细胞，如果发现未被刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可降低探针浓度。如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱，可升高O38 探针浓度，以提高检测的灵敏度。另外，探针装载的时间也可以根据情况在 15-60 分钟内适当进行调整，孵育温度在 4 -37 ℃ ℃内调整。
探针染色工作液配制：
根据样本数量，用 HBSS 将 BBoxiProbe® O38 荧光染料 1000-2000 倍稀释，配制成探针染色工作液。
探针标记
原位标记：仅适用于贴壁培养细胞。
1. 培养板/培养皿准备细胞样本。
2. 待细胞生长到合适丰度，去除细胞培养基，用 PBS 洗细胞一次。
3. 加入适量体积 37℃预热的含 O38 探针工作液。
4. 在 37℃细胞培养箱内于生长状态下避光孵育 20 分钟～60 分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
5. 移除染色液，用 PBS（pH7.4）洗涤细胞 3 次。以充分去除未进入细胞内的 O38 探针。
6. 加入 200 µL HBSS 缓冲液。
7. 荧光酶标仪、荧光显微镜（含合适滤片）检测。最大激发/发射波长为 510 nm / 610 nm。
收集后标记：悬浮细胞或贴壁细胞消化处理
1. 离心，吸除上清培养基。
2. 用 PBS 洗细胞一次。
3. 细胞收集后重悬浮于稀释好的 37℃预热的 O38 探针工作液中，细胞浓度为 1*106-2*107/毫升。
4. 于生长状态下 37℃细胞培养箱内避光孵育 20-45 分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
每隔 3-5 分钟颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。
5. 离心，吸除染色液，加入 PBS（pH7.4）重悬细胞，洗涤 3 次。以充分去除未进入细胞内的 O38 探针。
6. 用 HBSS/PBS/无血清细胞培养基重悬细胞。
7. 用荧光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪检测。
最大激发/发射波长为 510 nm / 610 nm。
一氧化氮检测：
1. 对于原位标记探针的样品可以用荧光酶标仪检测，或者用激光共聚焦显微镜、荧光显微镜，接拍照分析
（需要有相关的荧光强度分析软件）。
2. 或收集细胞后标记探针然后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。
3. 对于收集细胞后标记探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，用光共聚焦显
微镜直接拍照分析也可以（需要有相关的荧光强度分析软件）。
4. 使用 510 nm 激发波长，610 nm 发射波长，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。
5. 荧光强度强，一氧化氮含量高。
常见问题分析：
1.一氧化氮结果如何分析？
通过设置参照样本，以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化，这个“相对”是针对参照的。分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。
反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其 NO 的变化，测定其 NO 是增加或者降低了。
2.荧光照片如何分析？
需要有相关的荧光强度分析软件。NO 表达水平直接通过荧光信号的强弱和分布范围来体现。
有的显微镜扫描下来的图像本身就可以测面积和强度，可以同时测不同颜色的荧光强度。有的显微镜不支持此功能，可以将荧光染色彩色图像转换为黑白的灰度图，然后再以灰度值作为测量指标进行分析。
要结合明场的照片具体分析。如果细胞分布均匀可以算固定面积荧光强度。成像时中心和四周有差异时，一般将四周剪切掉也可以。如果细胞分布不匀，需要找到细胞分布匀称的视野，一个视野一个视野找。
如果要用图片做结果，就要平行做多个图片，作分析，统计，每张都要求荧光分布尽量一致。
为了去除杂光的影响，可以适当调节统计荧光的强度范围，将信号过弱的背景杂光去除掉。
对照组和实验组整张图片需要做同样的处理，保证所有参数均要一致。
对于不同情况荧光强度的统计方法，根据实验需要或参考文献。可以算等面积的平均强度；也可以算阈值高于一定值的平均强度；也可以算荧光的累积而不算平均。要根据课题需要选择合适的测量统计方法。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：一氧化氮,NO检测试剂盒,一氧化氮检测试剂盒（NO检测试剂盒）（红色荧光）
