游离氨基酸样品前处理简要步骤

提供者：上海仁特检测仪器有限公司发布时间：2012/8/13 15:04:35 阅读次数：2044次进入该公司店铺

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游离氨基酸样品前处理简要步骤

游离氨基酸样品前处理（固体）

1、匀浆或粉碎样品；

2、称取1g左右（或根据最终氨基酸浓度估算）样品，用50ml 0.01N 盐酸浸提30min；

3、摇匀后过滤，准确吸取滤清液2ml 于离心试管中，加入8%磺基水杨酸2ml，混匀，静置15min；

4、3000rpm离心20min 或10000rpm离心10min；

5、取上清液，过0.45um或0.22um膜后上机；

游离氨基酸样品前处理（液体）

1、吸取约8ml 样品于离心试管中，3000rpm离心5min（达到分离固态物的目的即可）；

2、准确吸取上清液1ml 于另外的离心试管中，加入2%磺基水杨酸9ml，混匀，静置15min；

3、3000rpm离心20min 或10000rpm离心10min；

4、取上清液，过0.45um或0.22um膜后上机；

注：

1、依据经验，磺基水杨酸最终浓度2%－－5%蛋白沉淀效果最好；

2、如果脂肪含量超过3%，沉淀蛋白前先用正己烷脱脂（摇匀静置，分层后弃上层，取下层）；

3、最终上机液浓度应为每种氨基酸10nol/ml – 200nmol/ml；

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