产品介绍

AF405 ECL是将从刺桐（Erythrina Cristagalli）种子中天然提取纯化的刺桐凝集素，与Alexa Fluor 405荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性紫外蓝通道标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对Neu5Ac/Neu5Gc型唾液酸残基的高亲和力识别特性，依托Alexa Fluor系列染料优化的磺化氧杂蒽骨架，兼具高水溶性与的光漂白抗性，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统蓝光通道标记凝集素亮度不足、水相溶解度差、多色实验串扰难控制的痛点。试剂为淡黄至橙黄色冻干品，在中性生理缓冲液中溶解分散性，是紫外蓝通道开展唾液酸靶向糖链研究的经典标杆级工具。

基础参数

中文名称：AF405标记刺桐凝集素，AF405-刺桐凝集素

英文名称：AF 405 ECL，Alexa Fluor405-ECL，AF405-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态：淡黄至橙黄色冻干品

荧光光谱参数：最大激发波长约400 nm，发射波长约420 nm，完全适配常规405 nm激光线与DAPI通道滤光片组

储存条件：-20℃避光密封干燥长期保存，冻融次数控制在3次以内，开封后建议分装为单次使用量，铝箔包裹避光存放，工作缓冲液中DMSO含量建议控制在5%以下

用途：细胞表面唾液酸残基蓝光通道荧光标记，活细胞流式多色分选，共聚焦显微成像蓝通道定位

作用机理

AF405 ECL中的刺桐凝集素为天然二聚体结构，每个单体的N端都带有独立的糖结合口袋，通过His-Asp-Cys三残基协同形成多氢键网络，配位唾液酸的C-6羧基与C-9羟基，实现对Neu5Ac/Neu5Gc的高选择性识别。AF405荧光基团通过酰胺键锚定在ECL蛋白表面的赖氨酸残基上，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在400nm波长激发下，偶联在蛋白上的AF405基团可发射出明亮的420nm蓝色荧光，该通道与后续绿光、橙光、远红光通道的光谱重叠度极低，是构建4-5色多色荧光实验的理想通道标记探针。

应用领域

AF405 ECL可用于活细胞流式多色分选，依托其蓝光通道低串扰特性，在流式细胞仪上作为通道标记活细胞表面的唾液酸残基，配合后续多色探针实现多参数同步分析，完成特定唾液酸高表达细胞亚群的分选。该试剂可应用于共聚焦显微成像，作为蓝通道探针与其他波段探针联合使用，在固定细胞样本中观察唾液酸在细胞膜糖被上的分布模式，实现多靶标的清晰共定位观察。同时它也适用于糖酶学功能验证，作为底物探针检测唾液酸酶处理前后样本中靶标信号的强度变化，直观反映唾液酸酶的酶切活性，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的经典工具。

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