基础参数

中文名称：Alexa Fluor 350标记刺桐凝集素，AF350-刺桐凝集素

英文名称：AF 350 ECL，Alexa Fluor350-ECL，AF350-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态：浅黄色至浅橙色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发波长约346 nm，发射波长约442 nm，完全适配常规紫外激发、蓝光发射荧光滤光片组

储存条件：-20℃避光密封干燥长期保存，避免反复冻融；复溶后建议分装为单次使用量，4℃避光短期可稳定存放，操作全程严格避光，避免长时间暴露于紫外光照环境导致荧光猝灭

用途：半乳糖基糖链蓝光通道特异性标记，多色荧光成像通道标记，细胞表面特定糖蛋白分布示踪

产品介绍

AF 350 ECL是将从刺桐（Erythrina Cristagalli）种子中天然提取纯化的刺桐凝集素，与Alexa Fluor 350荧光染料通过活性酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性蓝光通道标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对半乳糖基相关糖链结构的高亲和力识别特性，依托Alexa Fluor 350染料优化的近紫外激发荧光骨架，相比传统DAPI类短波长染料拥有更的光稳定性与更高荧光量子产率，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统蓝光标记凝集素光漂白快、水相溶解度不足的痛点。试剂为浅黄色至浅橙色冻干粉，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是多色荧光成像体系中经典的蓝光通道凝集素标记工具。

作用机理

AF 350 ECL中的刺桐凝集素蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中含半乳糖基、N-乙酰半乳糖胺残基的糖链结构，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。AF350荧光基团通过稳定的酰胺键锚定在ECL亚基表面的赖氨酸残基上，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在346nm近紫外光激发下，偶联在蛋白上的AF350基团可发射出明亮的442nm蓝色荧光，该波段与后续绿光、橙红、远红通道的荧光探针光谱重叠度极低，几乎不存在通道串扰，是多色成像体系中理想的通道标记选择。

应用领域

AF 350 ECL可用于多色荧光共定位成像，依托其蓝光通道低串扰特性，作为多色体系的通道探针标记半乳糖基糖链，与后续绿光、橙红、远红通道的抗体或其他凝集素探针联合使用，在同一视野下同步观察4种及以上不同靶标的空间分布。该试剂可应用于流式细胞术多参数分析，作为紫外激发蓝光检测通道的探针标记细胞群体中靶标糖链高表达亚群，与其他不同激发波长的荧光探针配合完成多参数同步检测。

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