产品介绍

AF 660 PHA-E是将从菜豆（Phaseolus vulgaris）种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E，与Alexa Fluor 660荧光染料通过成熟的共价偶联工艺制备而成的糖链特异性近红外一区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性，对该类特殊糖链修饰具有的选择性，同时依托Alexa Fluor 660硅氧烷环骨架的近红外荧光分子特性，兼具高光量子产率与极强抗光漂白能力，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统可见光区标记凝集素在厚组织样本中自发荧光干扰大、成像深度受限的痛点。试剂为蓝紫色至深紫色冻干粉，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是近红外一区开展菜豆凝集素靶向糖链厚组织成像研究的标杆级专用工具。

基础参数

中文名称：AF660标记菜豆凝集素E，AF660-外源凝集素(菜豆)

英文名称：AF 660 PHA-E，Alexa Fluor660-PHA-E，Alexa Fluor660-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态：蓝紫色至深紫色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发波长约660 nm，发射波长约670 nm，斯托克斯位移约10 nm，荧光量子产率高

储存条件：-20℃以下避光密封干燥保存，避免反复冻融；操作全程避光，近红外染料光稳定性虽优于可见光染料，长时间强光照射仍会衰减荧光，配好的工作液建议当日使用

用途：β-1,6-分支N-连接寡糖近红外一区荧光标记，厚组织切片深层成像，多色成像远红通道搭建

作用机理

AF 660 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 660荧光基团通过马来酰亚胺或异硫氰酸酯等化学交联键偶联至凝集素表面赖氨酸残基，偶联过程中染料的活性基团仅与蛋白表面的伯胺反应，完全不干扰凝集素的碳水化合物识别域活性，偶联后凝集素的糖结合活性不受影响。在660nm波长激发下，偶联在蛋白上的Alexa Fluor 660基团可发射出明亮的670nm近红外荧光，该波段处于生物样本自发荧光极低的近红外一区，光在生物组织中的散射损耗大幅降低，直接将凝集素的糖链识别事件转化为高信噪比的深层成像荧光信号。

应用领域

AF 660 PHA-E可用于流式细胞分析，标记识别β-1,6-分支N-连接寡糖的细胞亚群，作为远红通道探针与其他可见光区探针配合，实现多色细胞分选与定量分析。该试剂可应用于荧光显微观察，依托近红外发射通道自发荧光干扰小的特性，对厚组织切片进行深层成像，清晰呈现组织内部不同区域的靶标糖链空间分布模式。同时它也适用于糖蛋白与糖脂研究，筛选甘露糖化修饰相关的糖蛋白，解析糖基化修饰在细胞识别中的功能意义，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的标杆级工具。

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