产品介绍

AF 405 PHA-E是将从菜豆（Phaseolus vulgaris）种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E，与Alexa Fluor 405荧光染料通过成熟的共价偶联工艺制备而成的糖链特异性紫外-蓝区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性，对该类特殊糖链修饰具有的选择性，同时依托Alexa Fluor 405染料优化的荧光骨架，兼具高量子产率与极强的抗光漂白能力，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统同波段蓝色荧光标记凝集素光稳定性差、长时间成像信号衰减快的痛点。试剂为白色至淡蓝色冻干粉，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是紫外-蓝区开展菜豆凝集素靶向糖链研究的经典多色成像专用工具。

基础参数

中文名称：AF405标记菜豆凝集素E，AF405-外源凝集素(菜豆)

英文名称：AF 405 PHA-E，Alexa Fluor405-PHA-E，Alexa Fluor405-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态：白色至淡蓝色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发波长约396 nm，发射波长约418 nm

储存条件：-20℃避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后建议4℃避光短期储存，2周内使用完毕，操作过程中全程严格避光，避免接触强氧化环境，防止荧光染料发生不可逆光漂白降解

用途：β-1,6-分支N-连接寡糖蓝区荧光标记，多色成像通道搭建，细胞表面糖基化模式分析

作用机理

AF 405 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 405荧光基团通过NHS活性酯与PHA-E蛋白表面赖氨酸残基的氨基反应形成稳定酰胺键，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在405nm波长激发下，偶联在蛋白上的Alexa Fluor 405基团可发射出明亮的418nm蓝色荧光，该波段处于紫外-蓝光交界区，作为多色成像体系的通道，可与后续FITC、Cy3、Cy5等多个可见光通道探针实现极低串扰的多色共标记，无需复杂的光谱拆分操作，一步孵育即可完成靶标糖链的原位标记。

核心产品优势

AF 405 PHA-E的核心差异化优势集中在紫外-蓝区的高稳定性与低串扰表现上，相比传统同波段的蓝色荧光染料标记凝集素，Alexa Fluor 405染料的量子产率更高，抗光漂白能力更强，长时间连续激光扫描下信号几乎无明显衰减，完全支持共聚焦显微镜下的长时间层扫成像。试剂经过严格的游离染料去除工艺，游离染料残留低于2%，非特异性吸附极低，同时其发射光谱与后续多个可见光通道的荧光光谱重叠度极低，作为多色成像的通道使用时，几乎不会向后续通道产生信号串扰，大幅降低多色成像的背景校正工作量，是蓝区开展β-1,6-分支N-连接寡糖研究的多色成像专用标杆工具。

应用领域

AF 405 PHA-E可用于细胞表面糖基化模式分析，依托其高亮度与低背景特性，通过荧光显微镜或流式细胞仪清晰呈现不同细胞系表面β-1,6-分支N-连接寡糖的表达分布差异。该试剂可应用于植物组织切片糖结构定位，将探针应用于植物根、茎、叶的冷冻切片，直观呈现植物组织内特定多糖的分布特征，为植物细胞壁结构研究提供示踪手段。同时它也适用于多色荧光成像体系构建，作为蓝区通道探针，与多个不同波段的荧光标记物联合使用，搭建低串扰的多色标记体系，实现多个靶标分子的同时示踪，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的经典工具。由陕西 新.研.博.美 生物科技小编木木整理

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