人总胆固醇ELISA血清样本处理必须严格控时控条件，否则结果偏差会直接超出可接受范围。

采血前前置准备

严格‌空腹12小时‌采血，采血前3天避免高脂饮食、饮酒和剧烈运动。

止血带使用时间不超过1分钟，防止局部血液浓缩导致胆固醇结果偏高。

优先采集无溶血的静脉血，中重度溶血样本直接弃用。

分离血清核心步骤与时间红线

采血后室温静置‌2小时‌，或4℃过夜让血清充分凝固。

凝固完成后1000×g离心‌20分钟‌，在采血后4小时内完成血清分离。

分离时小心吸取上层清亮血清，绝对不要触碰下层血细胞层。

若使用血浆替代，必须在采血后‌30分钟内‌完成2-8℃ 1000×g离心15分钟。

样本保存与冻存红线

4℃短期存放不得超过‌5天‌，超过时限必须分装冻存。

长期保存按单次检测用量分装，置于-20℃或-80℃环境，避免反复冻融。

冻融次数严格控制在‌≤2次‌，防止脂蛋白结构破坏导致结果失真。

绝对不能碰的操作红线

样本中禁止加入叠氮钠，它会完全抑制HRP酶活性直接造成假阴性。

浑浊脂血样本检测前需5000×g离心5分钟去沉淀，否则会干扰显色。

溶血样本直接弃用，红细胞释放的过氧化物酶会引发非特异性显色，结果完全不可靠。