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使用血清应注意的问题

提供者:上海远慕生物科技有限公司   发布时间:2026/9/21 15:38:15  阅读次数:198次  进入该公司店铺

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使用血清应注意的问题:

1、血清使用前,是否应在56℃,30分钟加热血清以灭活补体系统?

激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。实验显示,经过正确处理的热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞生长只有微小的促进或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率降低。而经过热处理的血清沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染。而把血清放在37℃环境中又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量。

2、为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?

有些胎牛血清产品没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白,如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。建议在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。

3、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现:

血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成。而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后也会存在于血清中,也是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不使用过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。

4、如何避免沉淀物的产生?
我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作:(1)解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃过夜,37℃水浴解冻)。若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),非常容易产生沉淀物。(2)解冻血清时要随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(3)请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。(4)如果在高于40℃的水浴中融化并且不时常摇晃混匀,非常容易造成沉淀物增多。同样血清的热灭活也造成沉淀增多,若非必要,可以省去热灭活。(5)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。


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