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基于液滴共包封的单孢子水平高通量药物敏感性筛选平台

提供者:赫尔纳贸易(大连)有限公司   发布时间:2026/9/11 9:31:11  阅读次数:236次  进入该公司店铺

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王**
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1. 实验方法

采用ChipShop Fluidic 719 液滴生成与存储芯片(聚碳酸酯材质):孢子悬液与杀菌剂溶液经流动聚焦与油相(HFE-7500+1% FluoSurf)汇流,三者以 1:1(水相内比)共包封为约 100µm 液滴,液滴在芯片内置存储位被物理捕获并长期保存。设定油相 210mbar、孢子悬液与药液各 200mbar,保持孢子悬液:药液流量比恒为 1:1 以保证液滴内 50:50 组成。孵育 4h/24h 后显微镜下读取孢子萌发率,计算抑制率。

2. Elveflow 系统优势分析

(1)三通道同步压力控制:共包封实验的核心是“油相—孢子—药液”三路流量的同步稳定。OB1 单机提供最多 4 个压力通道,配合 3 个 MFS 3D 流量传感器实现三路闭环,任一路的扰动都会破坏液滴内试剂的最终浓度——实测液滴 CV<3%,保证了 7 个浓度梯度(0.015–6µg/µL)的剂量学严谨性。

(2)剂量-响应数据的可信度:6µg/µL 组 4h 萌发抑制率 98.6%,最低浓度组 6.9%,各浓度间差异具有统计学显著性(P<0.05),且结果与水琼脂法、96 孔板法一致性良好。液滴内浓度的精确可设定性使 EC50 类参数的测定达到微流控水平的分辨率。

(3)通量与试剂经济学:每浓度仅需数百液滴(每滴数 nL 量级),试剂消耗较孔板法下降 2–3 个数量级;存储位设计使“包封—孵育—读出”在同一芯片内完成,人工干预仅存在于上下芯片环节。

(4)个体异质性分析能力:单孢子包封使筛选数据天然携带个体维度——可统计孢子间萌发速率的分布,而非仅获得群体均值。这是孔板法在原理上无法提供的信息维度,对抗药性亚群研究尤为重要。

(5)自动化序列:ESI 软件可编排多浓度序列的连续生产,配合 TTL 触发与成像系统联动,向全自动筛选平台扩展。

3. 结语

液滴筛选平台的价值在于“浓度精确+个体分辨率+通量”的三重增益。OB1 三通道闭环控制确保了液滴内试剂浓度的确定性,使剂量-响应曲线在单个体水平上可重复测定,为药物与农化化合物敏感性筛选提供了方法学升级路径。


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