1. 实验方法
采用ChipShop Fluidic 719 液滴生成与存储芯片（聚碳酸酯材质）：孢子悬液与杀菌剂溶液经流动聚焦与油相（HFE-7500+1% FluoSurf）汇流，三者以 1:1（水相内比）共包封为约 100µm 液滴，液滴在芯片内置存储位被物理捕获并长期保存。设定油相 210mbar、孢子悬液与药液各 200mbar，保持孢子悬液：药液流量比恒为 1:1 以保证液滴内 50:50 组成。孵育 4h/24h 后显微镜下读取孢子萌发率，计算抑制率。
2. Elveflow 系统优势分析
（1）三通道同步压力控制：共包封实验的核心是“油相—孢子—药液”三路流量的同步稳定。OB1 单机提供最多 4 个压力通道，配合 3 个 MFS 3D 流量传感器实现三路闭环，任一路的扰动都会破坏液滴内试剂的最终浓度——实测液滴 CV<3%，保证了 7 个浓度梯度（0.015–6µg/µL）的剂量学严谨性。
（2）剂量-响应数据的可信度：6µg/µL 组 4h 萌发抑制率 98.6%，最低浓度组 6.9%，各浓度间差异具有统计学显著性（P<0.05），且结果与水琼脂法、96 孔板法一致性良好。液滴内浓度的精确可设定性使 EC50 类参数的测定达到微流控水平的分辨率。
（3）通量与试剂经济学：每浓度仅需数百液滴（每滴数 nL 量级），试剂消耗较孔板法下降 2–3 个数量级；存储位设计使“包封—孵育—读出”在同一芯片内完成，人工干预仅存在于上下芯片环节。
（4）个体异质性分析能力：单孢子包封使筛选数据天然携带个体维度——可统计孢子间萌发速率的分布，而非仅获得群体均值。这是孔板法在原理上无法提供的信息维度，对抗药性亚群研究尤为重要。
（5）自动化序列：ESI 软件可编排多浓度序列的连续生产，配合 TTL 触发与成像系统联动，向全自动筛选平台扩展。
3. 结语
液滴筛选平台的价值在于“浓度精确+个体分辨率+通量”的三重增益。OB1 三通道闭环控制确保了液滴内试剂浓度的确定性，使剂量-响应曲线在单个体水平上可重复测定，为药物与农化化合物敏感性筛选提供了方法学升级路径。
第12年
在线咨询5分钟应答
