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双荧光素酶试剂盒

MCE 国际站：Renilla-Firefly Luciferase Dual Assay Kit

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K1013

中文名称：双荧光素酶试剂盒

存储条件：-20℃, 1年避光保存

产品活性：MCE 双荧光素酶试剂盒含有高纯度的 D-荧光素、腔肠素以及比例优化的反应缓冲液，实现哺乳动物细胞双萤光素酶报告基因检测。

生物活性：MCE 双荧光素酶试剂盒中含有高纯度的D-荧光素、腔肠素以及比例优化的反应缓冲液。在双荧光素酶反应中，首先用 Firefly Luciferase Working Solution (含D-荧光素)检测萤火虫荧光素酶信号；随后，直接加入 Renilla Luciferase Working Solution (含腔肠素)，将萤火虫荧光素酶的信号猝灭，同时产生海肾荧光素酶信号。本试剂盒具有操作简单、检测快捷、灵敏度高等优点。

描述及优势：

MCE 双荧光素酶试剂盒中含有高纯度的D-荧光素、腔肠素以及比例优化的反应缓冲液。在双荧光素酶反应中，首先用 Firefly Luciferase Working Solution (含D-荧光素)检测萤火虫荧光素酶信号；随后，直接加入 Renilla Luciferase Working Solution (含腔肠素)，将萤火虫荧光素酶的信号猝灭，同时产生海肾荧光素酶信号。本试剂盒具有操作简单、检测快捷、灵敏度高等优点。

操作流程：1. 配制试剂 1.1 Lysis Buffer (1×) 的配制将 Lysis Buffer (5×) 用超纯水稀释 5 倍，配制成 1× 工作液。 1.2 萤火虫荧光素酶工作液 (Firefly Luciferase Working Solution) 的配制将 Firefly Luciferase Substrate 干粉管短暂离心后开盖，加入 1 mL Firefly Luciferase Buffer 将其全部溶解并混合均匀，然后将全部溶液移入剩余的 9 mL Firefly Luciferase Buffer 中，混匀。 1.3 海肾荧光素酶工作液 (Renilla Luciferase Working Solution) 的配制将 Renilla Luciferase Substrate 短暂离心后开盖，加入 1 mL Renilla Luciferase Buffer 混合均匀，然后将全部溶液移入剩余的 9 mL Renilla Luciferase Buffer 中，混匀。 Note: 所有试剂使用前需平衡至室温。萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶工作液配制完成后，分装、避光保存，避免反复冻融，-80℃可保存一年，-20℃可保存一个月。 2. 裂解细胞 2.1 细胞裂解时密度应小于 95%，细胞生长过密，易导致裂解不充分。质粒瞬转、病毒感染细胞后，需培养一段时间 (一般 48 小时)使荧光素酶充分表达。 2.2 去除培养基，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗 1 遍，注意不要将细胞吹起。 2.3 加入适量的 1× Lysis Buffer，用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。推荐用量见下表孔板类型 Lysis Buffer/孔 6-孔板 500 μL 12-孔板 200 μL 24-孔板 100 μL 48-孔板 50 μL 96-孔板 30 μL 2.4 将细胞培养板置于摇床上，室温、轻晃孵育 15 分钟。注：细胞数量较高时，可适当加大裂解液用量、延长裂解时间。 2.5 将裂解物转移到新的离心管中，4℃、12,000 rpm 离心 10 分钟，取上清备用。 3. 荧光检测 3.1 取 20 μL 细胞裂解物，加至 96 孔黑色不透底酶标板中。 3.2 取 100 μL 平衡至室温的萤火虫荧光素酶工作液加至上述反应板中，混匀后，用酶标仪测定萤火虫荧光素酶信号。 3.3 取 100 μL 平衡至室温的海肾荧光素酶工作液加至上述反应板中，混匀后，用酶标仪测定海肾荧光素酶信号。 3.4 结果分析：在以海肾萤光素酶为内参的情况下，用萤火虫萤光素酶所得发光值除以海肾萤光素酶所得发光值。根据得到的比值来比较不同样品间目的报告基因的激活程度。注：为了确保实验结果准确性，萤火虫荧光素酶 (fLuc) 和海肾荧光素酶 (rLuc) 的发光值均应为相对发光值 (RLU, relative light unit)。

品牌介绍:

MedChemExpress (MCE) 是全球领先的生命科学试剂供应商，于为生命科学研究与药物发现提供创新解决方案。我们提供包括抑制剂、化合物库、重组蛋白、抗体、多肽和一站式AI药物筛选等在内的全品类、高品质活性分子和技术服务，品质，是科研领域值得信赖的合作伙伴。MCE 总部位于美国新泽西州，并在全球范围内建立了多个研发、生产和物流中心。

的产品矩阵：
MedChemExpress 拥有超过 200,000 种以上的生物活性分子，覆盖广泛的信号通路与研究领域，包括靶点与疾病机制研究；检测、分析与质控；疾病建模与药物筛选；干细胞研究与细胞治疗；基因治疗以及其他药物发现领域。 ● 靶点与疾病机制研究：抑制剂与激动剂、PROTAC、ADC、重组蛋白、抗体抑制剂、多肽、诱导疾病模型产品、动物饲料产品 ● 检测、分析与质控：同位素标记化合物、荧光染料、参考标准品、抗体、酶、试剂盒 ● 干细胞研究与细胞治疗：GMP 小分子、类器官相关蛋白、Matrigel、培养基、血清 ● 基因治疗：小RNA、脂质体、佐剂、限制性内切酶、PCR、qPCR 试剂盒
一站式 AI 药物筛选平台
一站式AI药物筛选平台提供超过 200 种筛选库及多种化合物和表型筛选服务。这些服务包括 DNA 编码化合物库筛选、虚拟筛选、高通量筛选（HTS）、离子通道检测、激酶筛选与谱系分析、表型筛选、亲和质谱筛选、定制化合物合成、结构优化与分析服务等。我们于不断提升平台能力，通过打造一站式药物发现服务，推动科学研究，释放创新的无限潜力。

的生物信息学
• 靶点与信号通路：JAK、STAT、PD-1/PD-L1、KRAS、STING、铁死亡等；
• 权威支持：来自权威文献的体内/体外实验方案；
• 动态数据：超过 15 万条溶解度真实测试、数千万条基因信息、临床/批准跟踪数据；
• MedChemExpress 广泛应用：药理学与生物学研究，覆盖 400 余种疾病/领域研究，包括癌症、神经疾病、炎症、代谢、干细胞等；
• 7×24 专业服务：已服务客户百万次;前订单确保当日发货。

严格的多重质量控制
• 国际标准：严格遵循 ISO 9001:2015、ISO 9001、ISO 17025、ICH Q7 等质量与环境管理体系；
• 完整平台：400 多台精密仪器，1000 名研发与分析人员；
• 检测：NMR、HPLC、LC-MS、IR、元素分析等；
• MedChemExpress 生物验证平台：四大平台（分子/蛋白/细胞/体内实验）支持药效评估；
• MCE 中国官网：www.MedChemExpress.cn

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