导语

胶质母细胞瘤（GBM）是成人恶性程度最高的原发性颅内肿瘤，现有手术、放化疗及免疫治疗临床获益十分有限。近年领域证实：GBM可与神经元形成功能性突触、主动重塑脑内神经环路；但神经元环路重塑、肿瘤免疫抑制两大表型之间的直接因果关联长期缺乏完整机制阐释。

2025年，加州大学旧金山分校（UCSF）团队在《Nature Communications》（IF=18.1）发表重磅论文Glioma-neuronal circuit remodeling induces regional immunosuppression，完整解析肿瘤源性TSP1（血小板反应蛋白1） 作为核心分子，串联胶质瘤-神经元突触形成、谷氨酸能神经元过度兴奋、区域性免疫抑制的完整调控轴。

全文大量人脑组织、小鼠脑组织原位多色荧光定量、突触共定位计数、肿瘤相关巨噬细胞（TAM）原位分群依赖奥地利TissueGnostics TissueFAXS全景组织流式定量系统完成空间定量。本文结合原文实验数据，拆解该研究科学逻辑与组织定量技术支撑。

一、论文核心科学发现

1.肿瘤高功能连接区（HFC）高表达TSP1，大量诱导突触形成、谷氨酸能神经元过度兴奋，同步形成局部免疫抑制微环境；

2.HFC区域富集抗炎型Mo-TAMs，促炎巨噬细胞、CD8⁺效应T细胞浸润显著减少，抗原呈递通路下调；

3.敲除肿瘤TSP1可抑制突触发生、缓解神经元高兴奋性，重塑促炎免疫微环境，解除TAM对CD8⁺T的抑制；

4.临床抗癫痫药（抑制谷氨酸AMPAR）可逆转免疫抑制，延长荷瘤小鼠生存期，并提升CAR-T联合免疫治疗效果。

二、研究关键组织原位定量需求

1.突触原位共定位定量：Synapsin-1（突触前）、Homer-1（突触后）双标荧光共定位计数，标准化单位神经突突触密度；

2.TSP1蛋白全域荧光强度定量：区分HFC/LFC肿瘤区域蛋白表达梯度，消除局部视野抽样偏差；

3.原位免疫细胞亚群分群定量：同时区分Mg-TAM/Mo-TAM、CD86促炎/ CD206抗炎TAM、CD4/CD8 T细胞占比；

4.全景组织全域扫描：完整覆盖人脑FFPE切片、小鼠全脑切片，匹配空间转录组spot位置，实现多组学空间一一对应。

三、TissueGnostics TissueFAXS全景定量技术支撑

1.全切片全景扫描，捕捉GBM肿瘤空间异质性

人脑、小鼠脑组织切片尺寸大，HFC/LFC区域呈镶嵌式混杂分布；普通显微镜仅局部视野易丢失关键异质性区域。TissueFAXS全自动全景扫描可一次性采集整张切片多通道荧光图像，完整保留肿瘤浸润区、正常神经元、免疫细胞的空间分布，完美匹配10x Visium空间转录组定位信息

2. 突触共定位自动计数

多色共聚焦成像后导入TG分析软件，自动识别MAP2标记神经元突起，框选神经突区域，定量Synapsin-1/Homer-1重叠突触puncta，自动标准化为「每10μm神经突突触数量」，消除人工计数主观误差，支撑TSP1调控突触形成的定量结论。

3.组织原位“类流式”分群，实现切片单细胞分型

传统流式需消化组织、丢失空间信息；TissueFAXS可在完整组织切片内，基于多荧光标记强度对每一个细胞进行无监督分群，直接输出：

①Mg-TAM / Mo-TAM细胞空间分布与占比；

②CD86促炎/ CD206抗炎TAM亚群比例；

③CD4+、CD8+ T细胞全域分布。

原位分群结果与离体流式细胞数据高度吻合，同时保留细胞在肿瘤微环境中的原始空间位置，解释HFC区域免疫抑制的空间特异性。

Figure.1人类胶质母细胞瘤功能相关肿瘤内区域中不同的免疫相关基因表达程序及肿瘤相关巨噬细胞组成

Figure.3 TSP1基因敲除可降低胶质瘤相关的神经元过度兴奋性

Figure.4 TSP1-KO可缓解胶质瘤的免疫抑制作用