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产品推荐:WGA染色试剂盒

提供者:上海岑特生物科技有限公司   发布时间:2026/5/27 16:36:07  阅读次数:765次  进入该公司店铺

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王**
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原理:麦胚凝集素(WGA)是从谷物中提取出来,可以特异性的结合心肌细胞膜上的一种糖蛋白,二者结合起来可以将心肌细胞膜染出来。WGA 可以把心肌细胞膜染出来,这样是否肥大的细胞从图像与正常组的对比就可以看出,也可以用专门的软件对染出的细胞进行直径、面积等的测量,能够分析心肌细胞是否肥大。


试剂盒组成:

iFluor 488-WGA 染色液(即用型) 抗荧光淬灭封片剂(干固型) DAPI(即用型)


使用方法:

1、样本准备:

1)石蜡切片:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ。取出放在通风厨内,酒精晾干后放入自来水中稍洗,蒸馏水洗。

2)冰冻切片:取出低温冷冻的冰冻切片复温后,切片浸没于固定液中固定 10-30min,PBS 洗5min 重复 3 次。

3)细胞爬片(固定):培养好的去掉培养液,PBS 清洗 3 次,在细胞爬片上滴加固定液固定 10- 30min,PBS 洗 5min 重复 3 次。

2、抗原修复:组织切片置于盛满 PH 9.0 EDTA 碱性抗原修复液或者 PH6.0 柠檬酸修复缓冲液的修复盒中于微波炉内进行抗原修复。自然冷却后将玻片置于 PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 5min。(新鲜组织冰冻切片和细胞爬片省略此步骤)。

3、WGA 染色:组化防水笔画圈,然后滴加 iFluor 488-WGA 染色液于 37 度染色避光孵育 30min-2h(湿盒内放少量水),PBS 洗 5min 重复 3 次。

4、DAPI 复染细胞核:滴加 DAPI 即用型染液,避光室温孵育 5min-20min,PBS 洗 5min 重复 3 次。

5、封片:玻片滴加适量抗荧光淬灭封片剂,轻轻的从一侧盖下盖玻片(建议使用本试剂盒内抗荧光淬灭封片剂 ,封片过程应避免气泡)。

6、镜检拍照:切片于荧光显微镜/共聚焦/多通道荧光扫描仪/多光谱成像系统下观察并采集图像。

结果:Dapi 复染细胞核呈蓝色;iFluor 488-WGA 标记阳性呈绿色


注意事项:

1、WGA 染料存在淬灭的可能,建议试用本试剂盒内的抗荧光淬灭封片剂,并尽快成像。

2、对于活细胞染色,可不用固定,用 PBS 清洗掉培养液后,加入 WGA 染料 37 度避光 10-30min。

3、固定后的样本(如石蜡切片),须经过高温修复否则会造成染色阳性结果偏弱。

4、对于细胞样本,染色前避免使用通透液,否则会造成细胞内(如高尔基体和内质网)结构的染色。

5、WGA 染料建议分装后-20 度保存,尽量避免反复冻融。


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