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如何处理和保存ELISA检测中的标本?

提供者:上海笃玛生物科技有限公司   发布时间:2025/8/12 11:44:05  阅读次数:1838次  进入该公司店铺

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如何处理和保存ELISA检测中的标本?


ELISA 检测中标本的处理和保存方法如下:

标本处理

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血清:使用不含抗凝剂的采血管收集血液样本,室温放置 1 小时或 2-8℃过夜,然后于 2-8℃、1000×g 离心 20 分钟,取上清即可。

血浆:使用含抗凝剂(推荐 EDTA-Na2)的采血管收集血液样本,采集后 30 分钟内,在 2-8℃、1000×g 条件下离心 15 分钟,取上清。

细胞培养上清:将细胞培养上清液吸入离心管,2-8℃下 1000×g 离心 20 分钟,除去细胞碎片和杂质,取上清。

细胞裂解液:用冷的 PBS 清洗细胞,收集后再洗涤 3 次,每 106 个细胞加入 150-200μL PBS 重悬,可加入蛋白酶抑制剂,通过反复冻融或超声使细胞破碎,2-8℃、1500×g 离心 10 分钟,取上清。

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‌组织匀浆:用预冷的 PBS 冲洗组织,称重后切成小块,按 1:9 的重量体积比加入预冷 PBS,可加入蛋白酶抑制剂,用玻璃匀浆器在冰上匀浆,可进一步超声破碎或反复冻融,2-8℃、5000×g 离心 5-10 分钟,取上清。

尿液:使用无菌容器收集尿液样本,2-8℃下 1000×g 离心 20 分钟,除去杂质,取上清。

唾液:使用无菌 EP 管收集唾液后,2-8℃下 4000×g 离心 10 分钟,除去杂质,取上清。

标本保存

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若在 1 周内进行检测,可将标本保存于 2-8℃环境中。

若不能及时检测,应按一次使用量分装,冻存于 - 20℃(1 个月内检测)或 - 80℃(3 个月内检测)环境中,避免反复冻融。实验前,建议再次离心,除去沉淀物。




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