纯化线粒体溶解试剂盒产品说明书

主要用途

纯化线粒体溶解试剂是一种旨在通过化学裂解处理，使线粒体膜结构破坏而获得线粒体内的活性蛋白酶系统的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种线粒体（动物、人体、植物、昆虫等）的内容物预制备。可以被用于细胞凋亡、信号传递、古生物、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体中含有丰富的细胞色素氧化酶系统、细胞凋亡相关蛋白和独立的核外DNA。通过线粒体溶解，可以进行相关蛋白的独立分析。

产品内容

溶解液（Reagent A） 毫升

上样液（Reagent B） 毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，有效bao证6月

用户自备

线粒体分离试剂盒（G&VS10006）：用于获得线粒体组分

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

微型台式离心机：用于样品制备

涡旋震荡仪：用于混匀

实验步骤

1． 从－70℃冰箱里取出线粒体颗粒样品，置入冰槽里

2． （选择步骤）如果线粒体样品不是颗粒状态，而是液体状态且容积过大，放进4℃微型台式离心机离心20分钟，离心速度为16000g（或13000RPM，例如EPPENDORF 5415）

3． （选择步骤）小心抽去上清液

4． 加入xx微升溶解液（Reagent A）到线粒体颗粒样品中

5． 涡旋震荡15秒

6． 置入冰槽中孵育15分钟

7． 涡旋震荡60秒

8． 放进4℃微型台式离心机离心2分钟，离心速度为16000g（或13000RPM，例如EPPENDORF 5415）

9． 小心移取上清液到新的1.5毫升离心管――此为所有可溶性线粒体蛋白系统

10． 若暂时不予后续处理，保存在－20℃冰箱里或chang期保存，放进-70℃冰箱里

11． 继续进行下列操作：

操作一、可溶性线粒体蛋白电泳

1） 移取20微升上清液到新的1.5毫升离心管，

2） 加入xx微升上样液（Reagent B）

3） 涡旋震荡15秒

4） 放进微型台式离心机离心10秒，速度为2000RPM

5） 煮沸5分钟

6） 上样，进行电泳操作和西方杂交

操作二、线粒体总蛋白定量检测

1） 移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

注意事项

1． 本产品为20次操作

2． 整个操作须在4℃条件下进行

3． 操作时须戴手套

4． 建议使用10⁸细胞或200毫克组织获得的线粒体量

5． 如果线粒体样品的液体容量少于50微升，可直接加入100微升溶解液（Reagent A）进行操作，无需再次离心

6． 如果需检测不溶性线粒体蛋白，可保留线粒体溶解后的沉淀物，直接加入10微升上样液（Reagent B）和10微升用户自备的无离子水，然后继续操作一的步骤3至6

7． 本公司提供系列线粒体试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定无蛋白酶污染

3． 本产品经鉴定蛋白萃取产量和纯化程度高

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组分订购信息

编号 名称 规格

G&VS10018 纯化线粒体溶解试剂盒 20次

G&VS10018A 溶解液（Reagent A） 毫升

G&VS10018B 上样液（Reagent B） 毫升

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