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小鼠内皮素ELISA检测试剂盒-实验操作

提供者:上海仁捷生物科技有限公司   发布时间:2021/6/17 21:45:57  阅读次数:2748次  进入该公司店铺

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小鼠内皮素ELISA检测试剂盒-实验操作
1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

小鼠内皮素ELISA检测试剂盒-实验操作

【试剂配制】
1、 标准品
(1) 从试剂盒中取出一支标准品,于6000-10000rpm 离心30 。用1ml 样本稀释液溶解,并
用吸头对准冻存管底部反复吸打5 次以助溶解,充分混匀得到标准品S7,放置备用。
(2) 取7 个1.5 ml 离心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl 样本稀释液。吸取250μl 标准品
S7 到*个离心管中(S6),轻轻吹打混匀。从S6 中吸取250μl 到第二个EP 管中(S5),
轻轻吹打混匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。S0 为样本稀释液。
2、 洗液工作液
浓洗涤液按1:25倍用去离子水进行稀释。例如用量筒量取240ml去离子水,倒入烧杯或其
他洁净容器中,再量取10ml浓洗涤液,均匀加入,搅拌混匀,在临用配妥。浓洗涤液低温保
存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3、 生物素标记抗体工作液
生物素标记抗体液按1:100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释。如10μl生物素标记抗体加
990μl生物素标记抗体稀释液,轻轻混匀,在临用10分钟内配妥。
4、 辣根过氧化物酶标记亲和素工作液
辣根过氧化物酶标记亲和素按1:100倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如
10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液,轻轻混匀,在临用
10分钟内配妥。

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