海豹分支杆菌PCR检测试剂盒使用步骤及效果_技术交流_仪器仪表技术文献

海豹分支杆菌PCR检测试剂盒使用步骤及效果

提供者：上海谷研实业有限公司发布时间：2021/3/30 11:43:24 阅读次数：3355次进入该公司店铺

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海豹分支杆菌PCR检测试剂盒使用步骤及效果：

PCR反应特点

(1) 特异性强

PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物般用电泳分析，不定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

试剂使用须知：

（1）请参照相关法规、文献、MSDS等信息，理解并掌握好试剂的特性，再进行安全操作。

（2）通常购买试剂时定要想到次性用完。若估算不足有剩余的话，更加注意其他保管和管理。

（3）万试剂操作者并非业技术人员。必须在业人士的指导监督下进行操作。对于使用后的废弃物，不要或者旧的试剂，应按照相关法律法规正当处理。

（4）购买后，请务必确认标签上的注意事项；做好预防颠倒，摔坏的措施和管理体制；在使用再次确认标签上的注意事项，做好必要的安全对策；对没有标明其危害特性、有害特性的，也要慎重地进行操作；必须带好防护用具，小心翼翼进行操作。

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