Leucocytozoon spp.住白细胞原虫属通用PCR试剂盒以参照物为标,対PCR终产物进行分析或对PCR过程进行监测,从而达到评
样本中塑基因的持贝数,称为定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR打道的指数期进行
2、定量PCR定量的理论依据是什么?
特定的待基因片起始含量越大,则指数お増过程越短,当増速を趋于稳定后,则无论原来样品中起始模板含量多少,*終扩增片
段的含量通常是一样的。
理想的扩増结果:Y=Xx2n其中Y代表扩増产物量,X代表PCR反应体中的原始模板数n为扩増次数:理论上PCR扩増效本为1009
PCR产物随着循环的进行成指数増长,但实际上:DNA的每一次复制都不完全,即每一次打増中,模板不是呈2的倍长;实际应为
Y=X(1+En,其中E代表増效率:E=参与复制的模板/总模板,通常E≤1,E在혼个PCR扩増过程中不是目定不变的。通常X在1
105考贝、循环次数n≤30时,E相对稳定,原始模極以相对固定的指数形式增加,适合定量分析,这也就是所谓的指数期;随着循环次
数n的加(>30次),E值逐新减少,Y呈非固定的指数形式増加,*后进入平台期。
3、英光定量PCR定量的理论模式又是什么?
PCR是对原始待观模板核酸的一个扩増过程,任何干扰PCR指数的因素都会影响扩产物的量,使得PCR扩终产物的数量与原始模
板数量之间没有一个固定的比例关系,通过测扩增终产物很难对原始模板进行准确定量。近年来研究人员通过大量的实,研究了相
准确的定量PCR方法,即光定量PCR
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