摘要 本技术概述展示了 Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler 的进样原 理。在 Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler 中，在大气压条件下抽 取样品，加压至系统压力，并通过超快速注射过程进样。数据表明，1260 Infinity II SFC Multisampler 能够在极高的精度下以灵活的样品体积进样， 并在宽体积范围内具有优异的线性。


前言： 与经典 HPLC 仪器的可变样品引入 （其中填充有流动相的进样流路可以不 受影响地处于大气压下）相比，SFC 仪器必须避免在进样流路中使用环境 压力下的流动相，以防止致密的 CO2 蒸发。进样流路中 CO2 的蒸发可能 导致样品完全损失或进样不完全。因 此，在 SFC 中首选固定定量环方法， 该方法将之前填充的定量环切换至加 压的 CO2 流中。虽然这种方法使满环 进样获得了良好的峰面积精密度，但 是它需要过量填充定量环，因此会浪 费样品。当用于部分环填充时，需要 复杂的操作，并且会牺牲精度性能。 本技术概述展示了 Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler 的进样原理。 1260 Infinity II SFC Multisampler 相比 于广泛使用的固定定量环方法（其中 过量填充定量环导致样品浪费，而部 分定量环进样导致进样精度不佳）， 能够在极高的精度下以灵活的样品 体积进样。在 1260 Infinity II SFC Multisampler 中，在大气压条件下抽 取样品，加压至系统压力，然后通过 超快速注射过程进样至分析流路中。


实验部分： 仪器 Agilent 1260 Infinity II SFC 系统， 包括： • Agilent 1260 Infinity II SFC 控制模块 (G4301A) • Agilent 1260 Infinity II SFC 二元泵 (G4782A) • Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler (G4767A) • Agilent 1260 Infinity II DAD (G7115A)，配备高压 SFC 流通池 • Agilent 1260 Infinity II 高容量 柱温箱 (G7116A) 仪器设置 1260 Infinity II SFC Multisampler 直 接连接至 SFC 泵和下游色谱柱。通过 工厂安装的管路完成所有必要的冲洗 和清洗步骤。只需连接两种溶剂：一 种溶剂用于冲洗和注入过程，另一种 用于进样针清洗。色谱柱 Agilent ZORBAX Rx-Sil, 4.6 × 150 mm, 5 µm 软件 Agilent OpenLAB CDS ChemStation 版，适用于 LC 和 LC/MS 系统，修订 版 C.01.07 SR3 样品 咖啡因和可可碱溶液（各自浓度均为 250 mg/L 的甲醇溶液），咖啡因溶液 （0.5 g/100 mL 的甲醇溶液）以及可可 碱溶液（250 mg/L 的甲醇溶液）。 化学品 所有溶剂均购自德国 Merck 公司。化 学品均购自德国 Sigma-Aldrich 公司。


结果与讨论 ：固定定量环方法作为最先进的技术被 用于 SFC 仪器的进样。该方法能够 在高精度下以固定体积进样，但是通 过部分环填充进样的体积存在精度不 佳的问题。无法使用在 HPLC 仪器进 样中广泛应用的可变定量环概念，因 为液态 CO2 不能处于大气压下。否则 将由于蒸发而导致样品部分或完全损 失。为克服这一缺点，在用于 Agilent 1260 Infinity II SFC 系统的 1260 Infinity II SFC Multisampler 中推出了灵活的 进样原理。 安捷伦的注入进样技术可提供加压样 品，该样品通过注射过程在色谱柱之 前被注入 CO2 流中。在抽取样品前， 通过注入溶剂冲洗，对连接的定量 环、针头和针座进行清洗，同时将 SFC 泵连接至色谱柱。在抽取灵活的样品 体积后，在定量环中将样品加压至系 统压力。包含样品的加压定量环连接 至来自分析型 SFC 泵并流向色谱柱的 CO2 流。在该位置处，可通过注射过 程以可变的进样速度（注入速度）对 样品进样。为了将全部样品冲洗出定 量环，可指定过量填充体积（灌洗 体积）。


结论 本技术概述讨论了在极高精度下具有 灵活进样量的 Agilent 1260 Infinity II SFC Multisampler 的性能结果。在进 样量 0.5 µL 和 10 µL 之间获得的峰面 积 RSD 通常低于 0.3%。即使采用更 低的进样量（低至 0.1 µL），也获得 了通常低于 2.5% 的峰面积 RSD。结 果证明，进样线性通常优于 0.9995。 即使对于高达 80 µL 的进样量，也可 获得低于 0.3% 的优异的峰面积 RSD 值。采用大体积进样所获得的峰面积 线性也极其出色。灵活的样品引入仅 表现出 14 ppm 的可忽略不计的交叉 污染。这一性能与通常使用的满环模 式下的固定定量环自动进样器的性能 相当，但是具有可变定量环自动进样 器的高灵活性。